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대한체질인류학회 해부·생물인류학 대한체질인류학회지 제19권 제2호
발행연도
2006.6
수록면
137 - 148 (12page)

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허혈성/저산소 상태에서 신경손상을 유발하는 세포고사가 발생되는데, 이러한 신경세포자멸 기전 및 치료방법이 아직 정립되어 있지 않다. CoCl₂는 활성산소종(ROS)을 생산하는 등, 저산소 환경과 유사한 조건을 초래하는 것으로 알려져 있다. 본 연구의 목적은 PC12 세포에서 CoCl₂에 의한 저산소 상태에서 세포자멸기전에 대한 Bcl-2와 caspase들의 역할을 구명하는데 있다.
세포생장력은 MTT 방법으로 측정하였고, DNA 절편화 및 세포자멸 소체는 DNA laddering과 propidium iodide (PI) 염색법으로 조사하였다. Bcl-2와 Bax 발현정도는 RT-PCR법, Bid, Fas/APO-1 발현과 미토콘드리아에서 세포질로 분비된 cytochrome c는 Western blot으로 분석하였으며, caspase-3와 caspase-9 활성은 spectrophotometer 그리고 caspase-8의 활성은 fluorospectrometer에 의해 측정하였다.
CoCl₂ 투여는 PC12 세포수를 시간과 농도 의존적으로 감소시켰고, DNA 절편화 현상과 세포자멸 소체를 유도하였다. 또한, 미토콘드리아에서 세포질로 유리되는 cytochrome c양이 증가되었고, caspase-9와 -3의 활성이 증가되었다. 이러한 결과는 CoCl₂ 투여한 세포에서 유도된 세포자멸기전에 미토콘드리아가 매개되었음을 보여주었다. 한편, CoCl₂ 투여에 의해 Fas/APO-1의 발현이 증가되었고, caspase-8 활성이 증가된 결과로 CoCl₂ 유도된 세포자멸 기전에 death receptor 매개 신호경로와 연관되었음을 알 수 있었다. 또한, Bcl-2 family에 대한 RT-PCR 분석결과, 세포자멸를 억제하는 Bcl-2 발현은 감소되었으나, 세포자멸을 자극하는 Bax발현은 증가되었으며, 한편 pro-Bid 발현은 감소되었다.
따라서, 본 실험의 결과들은 PC12 세포에서 Bcl-2 family와 caspase들이 미토콘드리아와 death receptor를 매개하는 두 신호경로를 통해서 CoCl₂ 유도 세포자멸에 중요한 역할을 함을 시사하였다.
#PC12 cells #CoCl₂ #Apoptosis #Caspase #Bcl-₂family #Mitochondria #PC12 세포 #세포자멸 #미토콘드리아

목차

Abstract
Introduction
Materials and Methods
Results
Discussion
References
간추림

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