IL12 p40 형광 리포터 생쥐 시스템을 이용한 B16 F/T 항암 백신의 면역활성 연구

윤대선; 윤지희; 홍석만

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자료유형: 학술저널

저자정보: 윤대선 윤지희 홍석만

저널정보: 대한체질인류학회 해부·생물인류학 대한체질인류학회지 제20권 제2호

발행연도: 2007.6

수록면: 115 - 126 (12page)

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암은 심장 질환 다음으로 사망률이 높은 질환으로 전 세계 인구의 다섯 명 중 한 명은 암으로 사망하는 것으로 알려져 있다. 따라서 안전하고 효과적인 치료용 항암 백신을 개발하는 것이 그 어느 때보다 절실하다. 본 연구에서는 냉동/해동(freezing/thawing, F/T) 방법으로 제조한 세포 항암백신의 하나인 B16 melanoma F/T 백신(F/T 백신)의 면역활성 효과를 조사하였다.
IL12 p40 형광 리포터 생쥐의 골수로부터 유래한 수지상세포(dendritic cell)를 이용하여 F/T 백신이 항암 면역반응 유도에 중요한 IL12 p40과 수지상세포 활성 시에 수반되는 MHC 분자와 공동자극 분자의 발현 변화를 조사하였다. F/T 백신의 면역활성이 어떤 물질에서 유래하는지 DNase와 proteinase를 이용하여 조사하였다. MyD88 유전자 결손 생쥐를 이용하여 F/T 백신의 활성이 Toll 유사 수용체와 연관이 있는지 알아보았다.
F/T 백신은 IL12 p40의 발현을 유도하였고 MHC class II 분자와 공동자극 분자인 CD86의 발현을 증가시켰다. 흥미롭게도, F/T 백신은 항암 면역반응에 중요한 역할을 담당하고 있는 것으로 알려진 자연살해T 세포의 활성에 영향을 주는 CD1d 분자의 발현 증가도 유도하였다. 그리고 F/T 백신의 면역활성은 주로 단백질에 기인하고 이러한 면역활성은 MyD88 의존적이라는 것을 알 수 있었다.
종합해 보면, 본 연구결과는 IL12 p40 형광 리포터 생쥐 시스템을 통하여 F/T 백신의 면역보조제 효과를 확인하였고, 이러한 결과를 토대로 보다 정확한 F/T 백신의 면역활성 기전 규명을 통하여 새로운 치료용 항암 백신 개발에 대한 기초적인 지식을 제공할 수 있을 것으로 생각한다.

Since cancer has become the second most common cause of death, next to heart disease and approximately 20% of human population dies from cancer, it is much desired to develop therapeutic anti-tumor vaccine with safety and efficacy. Here we investigated the immunostimulatory effects of B16 freezing/thawing (F/T) anti-tumor vaccine (hereafter F/T vaccine), one of whole cell anti-tumor vaccines.
To this end, we took advantage of the IL12 p40 reporter system which is designed for monitoring the induction of IL12 expression via the detection of co-expressed yellow fluorescent protein. First, we examined whether F/T vaccine can induce IL12 expression using bone marrow-derived dendritic cells (BMDCs) from IL12 p40 reporter mice. Second, we examined whether F/T vaccine can change the expression level of MHC molecules and co-stimulatory molecules during the activation of dendritic cells. Third, to dissect what component of F/T vaccines accounts for the immunostimulatory activities, we examined the effect of F/T vaccine on BMDC activation after treating it with DNase or proteinase. Lastly, we used MyD88 knockout mice to investigate whether F/T vaccine activates BMDCs in a TLRdependent manner.
We found that treatment of BMDCs with F/T vaccine induced IL12 expression as well as the increase of MHC Ⅱ expression and co-stimulatory molecules such as CD86. Interestingly, we also found that F/T vaccine increased CD1d expression on BMDCs, which may influence the activation of natural killer T cells known to be involved in anti-tumor immune responses. In addition, we found that treatment of F/T vaccine with proteinase but not DNase abolished its immunostimulatory effect, indicating that proteins in F/T vaccine mainly have its adjuvant activity. Furthermore, the activation of BMDCs with F/T vaccine was dependent on MyD88 adaptor molecule.
Taken together, our findings in this study demonstrated that the F/T vaccine might be one of the valuable reagents to provide a new insight for underlying mechanism of whole-cell anti-tumor vaccines and an important clue for the development of better therapeutic anti-cancer vaccines.

#B16 F/T 항암 백신 #형광 리포터 생쥐 시스템 #인터루킨 12 #Toll 유사 수용체 #B16 F/T anti-tumor vaccine #Fluorescent reporter mouse system #Interleukin 12 #Toll-like receptor

참고문헌 (18)

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1. [학술지(정기간행물)] - Adachi O / 1998 / Targeted disruption of the MyD88 gene results in loss of IL-1- and IL-18- mediated function 9 : 143 ~ 150

2. [학술지(정기간행물)] - Appleman LJ / 2000 / CD28 costimulation mediates T cell expansion via IL-2-independent and IL-2-dependent regulation of cell cycle progression 164 : 144 ~ 151

3. [학술지(정기간행물)] - Appleman LJ / 2003 / T cell anergy and costimulation 192 : 161 ~ 180

4. [학술지(정기간행물)] - Bendelac A / 2007 / The biology of NKT cells 25 : 297 ~ 336

5. [학술지(정기간행물)] - Colombo MP / 2002 / Interleukin-12 in anti-tumor immunity and immunotherapy 13 : 155 ~ 168

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