지원사업
학술연구/단체지원/교육 등 연구자 활동을 지속하도록 DBpia가 지원하고 있어요.
커뮤니티
연구자들이 자신의 연구와 전문성을 널리 알리고, 새로운 협력의 기회를 만들 수 있는 네트워킹 공간이에요.
이용수
초록· 키워드
오류제보하기
최근에 Ciona intestinalis에서 확인된 막 전위 감지 탈인산화 효소는 이온 채널과 유사한 막 통과 도메인과 유사탈인산화 효소 도메인으로 이루어져 있다. 이 Ci-VSP는 그 막 통과 도메인에 의해 막 전위 변화를 감지하고 유사탈인산화 효소에 의해 인산화된 이노시틸 인지질들에 대한 탈인산화 활성을 보이는 것으로 알려져 있다. 본 연구는 6개의 히스티딘이 융합된 Ci-VSP의 유사 탈인산화 효소 도메인의 발현 시스템 구축을 추구하였다. 그래서 본 논문은 그 시스템의 구축과 발현 그리고 정제 조건 확립, 마지막으로 그 효소 동력학적인 활성을 pNPP에 대한 검토한 결과를 보고한다. 본 연구 결과에 따르면 Ci-VSP(248-576)-His 단백질 발현 및 정제시에 다른 단백질들의 정제 조건과 다르게 25 mM NaCl과 100 mM 정도의 이미다졸이 필요함을 확인하였다. 정제된 단백질을 가지고 탈인산화 효소의 대표적인 기질인 pNPP를 이용하여 그 동력학적인 상수 측정을 시도한 결과 정상 상태 동력학 측정 조건으로 온도 37℃, pH 5.0 내지 5.5, 반응 시간 30분 이내, 반응 단백질 양 2.0 ㎍ 이내가 적합하다는 점을 알게 되었다. 이러한 확립된 조건을 토대로 pNPP에 대한 동력학적 상수를 측정한 결과 K<SUB>m</SUB> 값은 354±0.143 μM 이며 V<SUB>max</SUB>는 0.0607±0.0137 μ㏖/min/㎎이며 k<SUB>cat</SUB> 값은 2.359±0.009751 min?¹인 것으로 확인되었다. 이를 통해 본 연구는 Ci-VSP(248-576)-His의 순도 높은 정제 결과와 pNPP에 대한 높은 활성 보임을 제시하였다. 이러한 연구 결과를 통해 향후 Ci-VSP에 대한 구조적인 연구 등을 포함하는 다양한 생화학적인 연구가 수행되리라 본다.
목차
서론
재료 및 방법
결과 및 고찰
결론
감사의 글
References
초록
참고문헌 (29)
참고문헌 신청
1. [학술지(정기간행물)] - Alabi, A. A. / 2007 / Portability of paddle motif function and pharmacology in voltage sensors / Nature 450 : 370 ~ 375
2. [학술지(정기간행물)] - Alonso, A. / 2004 / Protein tyrosine phosphatases in the human genome / Cell 117 : 699 ~ 711
3. [학술지(정기간행물)] - Bradford, M. M / 1976 / Rapid and sensitive method for the quantitation of microgram quantities of protein utilizing the principle of protein-dye binding / Anal. Biochem 72 : 248 ~ 254
4. [학술지(정기간행물)] - Chen, H. / 1999 / A testis-specific gene, TPTE, encodes a putative transmembrane tyrosine phosphatase and maps to the pericentromeric region of human chromosomes 21 and 13, and to chromosomes 15, 22, and Y / Hum. Genet 105 : 399 ~ 409
5. [학술지(정기간행물)] - Halaszovich, C. R. / 2009 / Ci-VSP is a depolarization-activated phosphatidylinositol-4,5-bisphosphate and phosphatidylinositol-3,4,5-trisphosphate 5'-phosphatase / J. Biol. Chem 284 : 2106 ~ 21013
2. [학술지(정기간행물)] - Alonso, A. / 2004 / Protein tyrosine phosphatases in the human genome / Cell 117 : 699 ~ 711
3. [학술지(정기간행물)] - Bradford, M. M / 1976 / Rapid and sensitive method for the quantitation of microgram quantities of protein utilizing the principle of protein-dye binding / Anal. Biochem 72 : 248 ~ 254
4. [학술지(정기간행물)] - Chen, H. / 1999 / A testis-specific gene, TPTE, encodes a putative transmembrane tyrosine phosphatase and maps to the pericentromeric region of human chromosomes 21 and 13, and to chromosomes 15, 22, and Y / Hum. Genet 105 : 399 ~ 409
5. [학술지(정기간행물)] - Halaszovich, C. R. / 2009 / Ci-VSP is a depolarization-activated phosphatidylinositol-4,5-bisphosphate and phosphatidylinositol-3,4,5-trisphosphate 5'-phosphatase / J. Biol. Chem 284 : 2106 ~ 21013
이 논문의 저자 정보
최근 본 자료
댓글(0)
0
UCI(KEPA) : I410-ECN-0101-2013-470-000501065