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CoPP는 다양한 세포에서 HO-1의 유전자 발현과 활성을 증가시키는 강력한 유도제로 알려져 있다. HO-1는 세포 및 조직의 손상을 보호한다는 연구가 활발히 진행되고 있으나, 그 작용 기전에 대해서는 아직 잘 모르고 있다. 본 논문에서는 porphyrin 계열의 CoPP의 자극에 의해 유도되는 HO-1 유전자 발현에서 NADPH oxidase의 활성이 미치는 영향을 인간 간암세포주 HepG2에서 조사하였다. 배양 중인 HepG2 세포에서 CoPP는 HO-1의 발현을 농도의존적으로 증가시키는 것을 확인하였다. NADPH oxidase 저해제로 잘 알려져 있는 DPI를 전처리한 후 CoPP로 자극한 세포에서는 HO-1의 발현이 강력하게 억제되는 것으로 나타났다. DPI의 이런 억제 효과가 HO-1의 전사 조절인자 Nrf2의 활성에도 영향을 줄 수 있기 때문에 DPI를 전처리 한 후 CoPP 자극에 의한 Nrf2의 핵으로의 이동을 분석하였다. 그 결과, DPI는 CoPP에 의해 유도되는 Nrf2의 핵으로의 이동과 세포 내 존재하는 양을 감소시키는 것을 확인하였다. 다른 HO-1 발현 유도제로 알려져 있는 hemin에 의한 자극의 경우에도 DPI는 HepG2 세포의 HO-1의 발현을 억제하는 효과를 나타내었다. 그리고, p47<SUP>phox</SUP>에 대한 siRNA를 사용하여 효과적으로 p47<SUP>phox</SUP> 유전자 발현을 knockdown 시켜서 NADPH oxidase의 활성을 억제시키는 방법을 사용하였다. 그 결과, p47<SUP>phox</SUP> silencing한 세포에 CoPP를 처리한 경우는 control siRNA를 처리한 세포와 비교할 때 HO-1 발현이 현저히 감소됨을 관찰할 수 있었다. 마지막으로, 세포 내 ROS 생성을 억제하는 GSHmee가 처리된 세포에서는 CoPP나 hemin이 Nrf2의 활성을 증가시키지 못하였고, 그 결과 HO-1의 발현을 유도하지 못하는 것을 알 수 있었는데, 이는 ROS가 CoPP나 hemin에 의한 HO-1 유전자 발현 과정에 중요한 역할을 한다는 것을 의미한다. 이를 종합해 볼 때, 인간 간암세포주 HepG2에서 CoPP나 hemin의 자극에 의한 HO-1 유전자의 발현에는 NADPH oxidase의 활성이 요구된다는 것을 알 수 있고, 그 활성은 세포 내 ROS를 생성시키는 것으로 역할을 한다고 여겨진다.
목차
서론
재료 및 방법
결과 및 고찰
감사의 글
References
초록
참고문헌 (30)
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1. [학술지(정기간행물)] - Anderson, M. F. / 2004 / Glutathione monoethylester prevents mitochondrial glutathione depletion during focal cerebral ischemia / Neurochem. Int 22 : 153 ~ 159
2. [학술대회논문] - Chan, K. / 2001 / An important function of Nrf2 in combating oxidative stress: detoxification of acetaminophen / Proc. Natl. Acad. Sci. USA : 4611 ~ 4616
3. [학술지(정기간행물)] - Chose, O. / 2008 / Distinct role of nox1, nox2, and p47 phox in unstimulated versus antiotensin II-induced NADPH oxidase activity in human venous smooth muscle cells / J. Cardiovasc. Pharmacol 51 : 131 ~ 139
4. [학술지(정기간행물)] - Cross, A. R / 1986 / The effect of the inhibitor diphenylene iodonium on the superoxide-generating system of neutrophils. Specific labelling of a component polypeptide of the oxidase / Biochem. J 237 : 111 ~ 116
5. [학술지(정기간행물)] - Doussiere, J. / 1999 / The heme component of the neutrophil NADPH oxidase complex is a target for aryliodonium compounds / Biochemistry 38 : 3694 ~ 3703
2. [학술대회논문] - Chan, K. / 2001 / An important function of Nrf2 in combating oxidative stress: detoxification of acetaminophen / Proc. Natl. Acad. Sci. USA : 4611 ~ 4616
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4. [학술지(정기간행물)] - Cross, A. R / 1986 / The effect of the inhibitor diphenylene iodonium on the superoxide-generating system of neutrophils. Specific labelling of a component polypeptide of the oxidase / Biochem. J 237 : 111 ~ 116
5. [학술지(정기간행물)] - Doussiere, J. / 1999 / The heme component of the neutrophil NADPH oxidase complex is a target for aryliodonium compounds / Biochemistry 38 : 3694 ~ 3703
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