ARDRA (amplified ribosomal DNA restriction analysis) 방법을 이용하여 주황해변해면(Hymeniacidon sinapium)의 배양 가능한 공생세균 군집에 대하여 봄과 여름의 계절에 따른 차이를 분석하였다. 공생세균의 배양은 변형된 Zobell 배지와 MA배지를 사용하였다. 분리된 균주의 16S rDNA를 증폭하고 제한효소 HaeIII와 MspI을 이용하여 제한효소 type을 구별하였다. 그 결과 봄 해면인 경우 23개, 여름인 경우 28개의 ARDRA type을 구별할 수 있었다. 각 type 별로 1?3개의 분리균주를 선별하여 부분 염기서열 분석 결과, 알려진 세균 종과 94% 이상의 유사도를 나타내었다. 봄 해면으로부터 분리된 세균들은 Alphaproteobacteria, Gammaproteobacteria, Firmicutes, Actinobacteria, 4개의 문(phylum)에 속하였으며 여름 해면의 공생세균은 Alphaproteobacteria, Betaproteobacteria, Gammaproteobacteria, Firmicutes, Bacteroidetes, 5개의 문에 포함되었다. Gammaproteobacteria는 봄 해면에서 33.8%, 여름 해면에서 67.4%가 각각 관찰되어 두 계절에서 우점하는 세균그룹으로 나타났으며 여름철에 증가하는 경향을 나타내었다. Firmicutes와 Actinobacteria의 경우 봄 해면에서 각각 30.2%, 8.3%로 관찰된 반면 여름해면에서는 6.9%, 0%로 관찰되어 여름철에 감소하는 세균 그룹이었다. Betaproteobacteria (4.7%)와 Bacteroidetes (4.7%)는 여름 해면에서만 관찰되었다. H. sinapium 해면에서 봄철에 비해 여름철에 더 다양한 세균그룹을 발견할 수 있었으며 동일한 해면 종일지라도 계절에 따라 공생세균 군집에 차이를 나타냄을 알 수 있었다.
Seasonal differences of the cultivable bacterial communities associated with the marine sponge, Hymeniacidon sinapium, between spring and summer were analyzed through the Amplified Ribosomal DNA Restriction Analysis (ARDRA). For the cultivation of the bacterial isolates, modified Zobell and MA media were used. The 16S rDNA of individual strains were amplified and fragmented by using two restriction enzymes, HaeIII and MspI. As a result, 23 ARDRA types from the spring sponge and 28 types from the summer sponge were obtained. The partial sequencing result of 1 to 3 selected strains from each types showed over 94% similarities with the known species from the public database. The bacterial communities from the sponge, captured on spring, contained 4 phyla: Actinobacteria, Alphaproteobacteria, Gammaproteobacteria, and Firmicutes. There were 5 phyla observed from the bacterial communities associated with the sponge, captured on summer: Alphaproteobacteria, Betaproteobacteria, Gammaproteobacteria, Firmicutes, and Bacteroidetes. Gammaproteobacteria was predominant group in both spring and summer, accounted for 33.8% of total in spring and 67.4% in summer, showed increase pattern on summer. Because Firmicutes and Actinobacteria participated in 30.2% and 8.3% of the spring sponge while they represented only 6.9% and 0% of the summer sponge, both bacterial groups showed decrease drift on summer. Betaproteobacteria (4.7%) and Bacteroidetes (4.7%) were only observed on the sponge captured on summer. On the sponge, Hymeniacidon sinapium, more diverse bacterial communities were shown on summer than on spring, and even from the same sponge, there were seasonal differences.