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DMSO는 배양포유류세포 동결보존의 동결보호제로써 일반적으로 사용 되어져 왔지만, DNA 메틸화 및 히스톤의 수식에 의해 일부 세포에서는 분화를 일으키는 것으로도 알려져 있다. 동결보존시의 배양세포의 안정된 분화 형질유지에는 메틸화를 일으키는 DMSO 이외의 동결보호제의 사용이 필요하다. 세포독성이 낮고, 동물정자동결 보존에 효과적인 것으로 알려진 아미도 화합물이 동일하게 포유류의 배양세포의 동결보존에서 동결보호작용이 있는지를(8종류의 아미드 화합물) 배양 마우스 혈관내피세포를 이용해 조사했다. 조사한 아미드 화합물 중에 아세트아미드와 락트아미드의 2종류가 배양세포에 대해서 동결보호작용이 있고, 가장 효과적인 것은 농도가 1.5 M의 락트아미드이다. 배양세포의 동결보존에 관해서는 삼투압 스트레스를 받지 않을 필요가 있기 때문에, 1.5 M 락트아미드 용액을 제작 시, 용매를 각 희석율의 PBS로 하고, 삼투압을 바꾼 동결 보존액에 동결세포의 생존율을 조사했다. 그 결과, 0.4배 농도의 PBS가 삼투압 스트레스를 가장 낮고 생존율이 가장 높음을 확인했다. 동결보존배지에 고 분자량재료를 첨가하면 세포생존율이 개선되는 것이 알려져 있기 때문에 BSA, HES, 데키스트란의 효과를 조사했다. 그 결과, 락트아미드를 이용한 동결보존배지는 0.4× PBS를 이용한 1.5 M 락트아미드용액에 1%의 BSA를 첨가한 경우, DMSO의 동결보호작용에 필적하는 동결보호작용을 나타내는 것을 확인했다.
목차
서론
재료 및 방법
결과 및 고찰
References
초록
참고문헌 (22)
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1. [학술지(정기간행물)] - Bird, A / 2002 / DNA methylation patterns and epigenetic memory / Genes Dev 16 : 6 ~ 21
2. [학술지(정기간행물)] - Dalimata, A. M. / 1997 / Cryopreservation of rabbit spermatozoa using acetamide in combination with trehalose and methylcellulose / Theriogenology 48 : 831 ~ 841
3. [학술지(정기간행물)] - Edwards, M. K. / 1983 / Induced muscle differentiation in an embryonal carcinoma cell line / Mol Cell Biol 3 : 2280 ~ 2286
4. [학술지(정기간행물)] - Hanada, A. / 1980 / Cryoprotective effects of some amides on rabbit spermatozoa / J Reprod Fertil 60 : 247 ~ 252
5. [학술지(정기간행물)] - Hunt, C. J. / 2003 / Cryopreservation of umbilical cord blood : 1. Osmotically inactive volume, hydraulic conductivity and permeability of CD34（+）cells to dimethysulphoxide / Cryobiology 46 : 61 ~ 75
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