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Pseudoalteromonas elyakovii 유래 alginate lyase 유전자(aly)를 대장균에서 발현시켰을 때, 발현된 대부분의 유전자 산물은 내포체라는 불용성 응집체 형태로 생산되었다. Alginate lyase를 가용성 및 활성형으로 생산하기 위해 Aeropyrum pernix K1 유래의 초고온성 샤페로닌 ApCpnA와 ApCpnB를 공발현 파트너로 도입하였다. aly와 ApCpnA와 ApCpnB 각각과의 공발현 결과, aly 단독발현 때의 alginate lyase 활성 10.1 unit/g-soluble protein에서 ApCpnA와의 공발현 때는 83.1 unit/g-soluble protein, ApCpnB와의 공발현 때는 100.3 unit/g-soluble protein으로 가용성 및 활성형으로의 alginate lyase 생산이 8~10배 크게 향상되었다. 다양한 배양 조건들의 조사를 통해 alginate lyase 최대 생산을 위한 조건은 다음과 같았다: 1.0 mM IPTG, 25℃ 배양 온도(IPTG 유도 후), ApCpnB 공발현 파트너. 이러한 공발현 시스템은 대장균에서 기능적으로 또한 의학적으로 중요한 재조합 단백질의 산업적 생산에 크게 유용하게 사용될 것이다.
목차
Introduction
Materials and Methods
Results and Discussion
References
초록
참고문헌 (27)
참고문헌 신청
1. [학술지(정기간행물)] - Bigotti, M. G. / 2005 / Cooperativity in the thermosome / J. Mol. Biol 348 : 13 ~ 26
2. [학술지(정기간행물)] - Chavagnat, F. / 1996 / Cloning, sequencing and overexpression in Escherichia coli of the alginate lyase-encoding aly gene of Pseudomonas alginovora : identification of three classes of alginate lyases / Biochem. J 319 : 575 ~ 583
3. [학술지(정기간행물)] - Frydman, J. / 2001 / Folding of newly translated proteins in vivo : the role of molecular chaperones / Annu. Rev. Biochem 70 : 603 ~ 647
4. [학술지(정기간행물)] - García-Fruitós, E. / 2007 / Divergent genetic control of protein solubility and conformational quality in Escherichia coli / J. Mol. Biol 374 : 195 ~ 205
5. [학술지(정기간행물)] - Gutsche, I. / 1999 / Group II chaperonins : new TRiC(k)s and turns of a protein folding machine / J. Mol. Biol 293 : 295 ~ 312
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3. [학술지(정기간행물)] - Frydman, J. / 2001 / Folding of newly translated proteins in vivo : the role of molecular chaperones / Annu. Rev. Biochem 70 : 603 ~ 647
4. [학술지(정기간행물)] - García-Fruitós, E. / 2007 / Divergent genetic control of protein solubility and conformational quality in Escherichia coli / J. Mol. Biol 374 : 195 ~ 205
5. [학술지(정기간행물)] - Gutsche, I. / 1999 / Group II chaperonins : new TRiC(k)s and turns of a protein folding machine / J. Mol. Biol 293 : 295 ~ 312
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