Helicobacter pylori에 감염된 인체 위상피 세포에서의 cyclooxygenase-2의 발현 및 apoptosis

정현채; 김정룡; 김정목; 김주성; 송인성

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자료유형: 학술저널

저자정보: 정현채 김정룡 김정목 김주성 송인성

저널정보: 대한내과학회 대한내과학회지 대한내과학회지 제62권 제2호

발행연도: 2002.1

수록면: 2 - 152 (151page)

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목적 : H. pylori의 감염은 위점막 상피 세포의 apoptosis를 유도할 뿐만 아니라 세포 증식을 변화시킨다. Prostaglandine (PG)의 생성을 유도하는 cyclooxygenase-2 (COX-2)는 상피세포의 증식을 변화시킬 수 있다. 본 연구에서는 H. pylori 감염에 의한 COX-2 유전자의 발현이 위상피 세포 apoptosis에 영향을 미칠 수 있는지를 검사하였다. 방법 : Hs746T 인체 위상피 세포에 H. pylori를 감염시킨 뒤, COX-2 mRNA 발현 분자수와 단백질은 각각 정량적 역전사 중합효소법과 Westen blot으로 검사하였다. 배양 상청액의 PGE2는 방사면역법으로 측정하였다. 위상피 세포의 apoptosis 정도는 flow cytometry 분석과 cell death detection ELISA를 이용하였다. 또한 caspase-3의 활성은 첨가한 기질 DEVD-pNA로부터 분해되는 p-nitroanilide를 측정하여 결정하였다. 결과 : H. pylori를 감염시킨 위상피 세포에서는 COX-2 mRNA와 단백질의 발현이 증가되었다. 그러나 COX-1 mRNA 발현은 변화가 없었다. 위상피 세포에서의 COX-2 mRNA 발현 정도는 cagA 유전자 또는 세포 독소 생성 유무와는 관계가 없었다. COX-2의 특이 억제제인 NS-398은 H. pylori에 의한 위상피 세포의 apoptosis를 유의하게 증가시켰을 뿐만 아니라 caspase-3 활성도도 증가시켰다. 그러나 COX-1 억제제인 valerylsalicylate는 H. pylori에 의한 위상피 세포의 apoptosis를 변화시키지 못했다.

Background : Helicobacter pylori induces apoptosis and alters the proliferation of gastric mucosal epithelial cells. Cyclooxygenase-2 (COX-2) is an inducible form of COX for prostaglandin (PG) synthesis, which has been known to cause alteration in epithelial cell growth. In this study, we examined whether COX-2 gene expression by H. pylori infection could influence gastric epithelial cell apoptosis. Methods : Human gastric epithelial cells were infected with H. pylori, after which COX-2 gene expression was evaluated using quantitative reverse transcription polymerase chain reaction (RT-PCR). The level of PGE2 was determined in culture supernatants by radioimmunoassay. Apoptosis and caspase-3 activation were also measured in H. pylori-infected gastric epithelial cells. Results : Expression of COX-2 mRNA and proteins was upregulated in Hs746T gastric epithelial cell lines infected with H. pylori, when assessed by quantitative RT-PCR and Western blot. However, COX-1 mRNA expression in H. pylori-infected Hs746T cells did not change. The extent of COX-2 mRNA expression and PGE2 production was similar in cagA-positive and cagA-negative strains and was not correlated with the presence of vacuolating cytotoxin. H. pylori infection resulted in apoptosis of gastric epithelial cell lines such as Hs746T. However, inhibition of COX-2 expression by NS-398, a specific COX-2 inhibitor, showed a significant increase of apoptosis and caspase-3 activation in Hs746T cells infected with H. pylori compared with H. pylori-infected cells without NS-398 treatment. In contrast, valerylsalicylate, an inhibitor that is relatively specific to COX-1, did not change the apoptosis levels of H. pylori-infected gastric epithelial cells.Conclusion : These results suggest that upregulated COX-2 expression by H. pylori infection can inhibit apoptosis of gastric epithelial cells.(Korean J Med 62:142-152, 2002)

#Apoptosis #Cyclooxygenase-2 #Epithelial cell #Helicobacter pylori #Prostaglandin #Stomach

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