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논문 기본 정보

자료유형
학술저널
저자정보
저널정보
대한생화학·분자생물학회 Experimental and Molecular Medicine Experimental and Molecular Medicine 제47권
발행연도
2015.1
수록면
1 - 12 (12page)

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N-acetylglucosamine kinase (GlcNAc kinase or NAGK) is a ubiquitously expressed enzyme in mammalian cells. Recent studies have shown that NAGK has an essential structural, non-enzymatic role in the upregulation of dendritogenesis. In this study, we conducted yeast two-hybrid screening to search for NAGK-binding proteins and found a specific interaction between NAGK and dynein light-chain roadblock type 1 (DYNLRB1). Immunocytochemistry (ICC) on hippocampal neurons using antibodies against NAGK and DYNLRB1 or dynein heavy chain showed some colocalization, which was increased by treating the live cells with a crosslinker. A proximity ligation assay (PLA) of NAGK-dynein followed by tubulin ICC showed the localization of PLA signals on microtubule fibers at dendritic branch points. NAGK-dynein PLA combined with Golgi ICC showed the colocalization of PLA signals with somal Golgi facing the apical dendrite and with Golgi outposts in dendritic branch points and distensions. NAGKGolgi PLA followed by tubulin or DYNLRB1 ICC showed that PLA signals colocalize with DYNLRB1 at dendritic branch points and at somal Golgi, indicating a tripartite interaction between NAGK, dynein and Golgi. Finally, the ectopic introduction of a small peptide derived from the C-terminal amino acids 74–96 of DYNLRB1 resulted in the stunting of hippocampal neuron dendrites in culture. Our data indicate that the NAGK-dynein-Golgi tripartite interaction at dendritic branch points functions to regulate dendritic growth and/or branching.

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참고문헌 (24)

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Berger M / 2002 / Structure and function of N-acetylglucosamine kinase. Identification of two active site cysteines / Eur J Biochem 269 : 4212 ~ 4218 google schola Brewer GJ / 1993 / Optimized survival of hippocampal neurons in B27-supplemented neurobasal, a new serumfree medium combination / J Neurosci Res 35 : 567 ~ 576 google schola Datta A. / 1970 / Studies on hog spleen N-acetylglucosamine kinase. I. Purification and properties of N-acetylglucosamine kinase / Biochim Biophys Acta 220 : 51 ~ 60 google schola Dotti CG / 1988 / The establishment of polarity by hippocampal neurons in culture / J Neurosci 8 : 1454 ~ 1468 google schola Esko JD / 2001 / Molecular diversity of heparin sulfate / J Clin Invest 108 : 169 ~ 173 google schola

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