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자료유형
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저자정보
저널정보
한국미생물생명공학회 Journal of Microbiology and Biotechnology Journal of Microbiology and Biotechnology 제18권 제11호
발행연도
2008.1
수록면
1,841 - 1,847 (7page)

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Vibrio vulnificus is a causative agent of serious diseases in humans, resulting from the contact of wound with seawater or consumption of raw seafood. Several studies aimed at detecting V. vulnificus have targeted vvh as a representative virulence toxin gene belonging to the bacterium. In this study, we targeted the rpoS gene, a general stress regulator, to detect V. vulnificus. PCR specificity was identified by amplification of 8 V. vulnificus templates and by the loss of a PCR product with 36 non-V. vulnificus strains. The PCR assay had the 273-bp fragment and the sensitivity of 10 pg DNA from V. vulnificus. SYBR Green I-based real-time PCR assay targeting the rpoS gene showed a melting temperature of approximately 84oC for the V. vulnificus strains. The minimum level of detection by real-time PCR was 2 pg of purified genomic DNA, or 103 V. vulnificus cells from pure cultured broth and 103 cells in 1 g of oyster tissue homogenates. These data indicate that real-time PCR is a sensitive, species-specific, and rapid method for detecting this bacterium, using the rpoS gene in pure cultures and in infected oyster tissues.
#Vibrio vulnificus #rpoS gene #real-time PCR #oyster

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[학 google schola APHA / 1984 / Laboratory Procedures for the Examination of Sea Water and Shellfish / APHA google schola Arias, C. R. / 1995 / Nested PCR method for rapid and sensitive detection of Vibrio vulnificus in fish, sediments, and water / Appl. Environ. Microbiol 61 : 3476 ~ 3478 google schola Ausubel, F. M. / 1987 / Current Protocols in Molecular Biology / John Wiley & Sons google schola Blackstone, G. M. / 2003 / Detection of pathogenic parahaemolyticus in oyster enrichments by real-time PCR. J. Microbiol / Meth 53 : 149 ~ 155 google schola

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