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The hyoscyamine 6β-hydroxylase (h6h) gene wasintroduced into the genome of Scopolia parviflora through theAgrobacterium rhizogenes binary vector system. The enzymewas expressed ally and tissue specific selectively in roots,resulting in five transgenic hairy root lines. The presence ofthe h6h gene in kanamycin-resistant hairy roots and itsoverexpression were confirmed by polymerase chain reaction(PCR), Northern blotting, and Western blotting, respectively.In the transgenic hairy root lines which constitutively expressedthe H6H enzyme, hyoscyamine and scopolamine accumulatedin high concentration. Among the transgenic hairy root lines thatexpressed the H6H enzyme, only two were more productive.The levels of tropane alkaloids in transgenic hairy root variedgreatly: The best transgenic line (#5) contained 8.12 mg ofscopolamine per g dry weight, which produced the compoundthree times more than wild-type root. These results suggest apossibility of improving the yield of tropane alkaloids in hairyroot lines by genetic and metabolic engineering.

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