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논문 기본 정보

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저널정보
한국미생물생명공학회 Journal of Microbiology and Biotechnology Journal of Microbiology and Biotechnology 제17권 제1호
발행연도
2007.1
수록면
81 - 88 (8page)

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The sprC gene encodes Streptomyces griseusprotease C (SGPC), a bacterial chymotrypsin-like serine protease.Because the published data on sprC was not complete, wecloned and analyzed a new DNA fragment spanning downstreamto upstream of the sprC gene from S. griseus IFO13350. Thecloned 2.3-kb DNA fragment was placed on a high-copynumber plasmid and introduced into Streptomyces lividansTK24. Chymotrypsin activity of the transformant was 8.5and stably maintained until 9 days of cultivation, whichclearly indicated that the cloned 2.3-kb fragment containedthe entire sprC gene with its own promoter. When the sameconstruct was introduced in the S. griseus IFO13350 (wildstrain) and its two mutant strains in the A-factor regulatorycascade, adpA and HO1, the chymotrypsin activity increasedfivefold only in the adpA strain. Transcriptional analysisbased on RT-PCR revealed that the sprC gene is normalytranscribed in both strains; however, earlier transcription wasobserved in the wild strain compared with the adpA strain.A gel mobility shift assay showed that the AdpA protein didnot bind to the promoter region of sprC. All these data clearlyindicate that the expression of sprC is not dependent on theAdpA protein, but is distinctly regulated from other chymotrypsingenes composing an AdpA regulon. Earlier morphologicaldiferentiation was observed in S. lividans TK24, and S. griseusIFO13350 and HO1, transformed with the expression vector.The transformant of S. griseus adpA formed markedly largercolonies. Antisense represion of sprC resulted in severe decreaseof chymotrypsin activity, down to one-third of the control, anddelayed morphological differentiation. All these data sugestthat SGPC is related to normal morphogenesis in S. griseus.
#sprC #Streptomyces griseus #SGPC #serineprotease #bacterial chymotrypsinStreptomycetes are Gram-positive soil bacteria that producemany kinds of secondary metabolites and proteases #andexhibit unique characteristics of morphological diferentiationde

목차

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참고문헌 (26)

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/ 1993 / Genetics of differentiation in Streptomyces : 685 ~ 713 google schola Bradford / 1976 / A rapid and sensitive method for the quantitation of microgram quantities of protein utilizing the principle of protein-dye binding : 248 ~ 254 google schola Brown / 1992 / Isolation and characterization of the major vegetative RNA polymerase of Streptomyces coelicolor A3 Renaturation of a sigma subunit using GroEL : 1133 ~ 1139 google schola Chater, K. F / 2003 / Signalling early developmental events in two highly diverged Streptomyces species 48 : 9 ~ 15 google schola Chi, W.-J / 2001 / Overexpression of SGPA and SGT induces morphological changes in Streptomyces lividans 11 : 1077 ~ 1086 google schola

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