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논문 기본 정보

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저자정보
저널정보
한국미생물생명공학회 한국미생물·생명공학회지 한국미생물·생명공학회지 제40권 제4호
발행연도
2012.1
수록면
339 - 347 (9page)

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이 논문의 연구 히스토리 (2)

2012

Multiplex Reverse Transcription-PCR for Simultaneous Detection of Reovirus, Bovine Viral Diarrhea Virus, and Bovine Parainfluenza Virus during the Manufacture of Cell Culture-derived Biopharmaceuticals
Seon Hwan Oh ,  Jung Eun Bae ,  김인섭 한국미생물·생명공학회지 2012.01 학술저널

2008

Detection of Minute Virus of Mice, Bovine Herpesvirus, and Bovine Parvovirus by multiplex-PCR during the CHO(Chinese hamster ovary) cell-derived biopharmaceuticals process
Seon Hwan Oh ,  Jung Eun Bae ,  Dong Hyuck Lee 외 1명 한국생물공학회 학술대회 2008.10 학술대회자료

초록· 키워드

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Viral safety is an important prerequisite for clinical preparations of mammalian cell culture-derived biopharmaceuticals,because numerous adventitious viruses have been contaminated during the manufacturing process. In particular, Chinese hamster ovary (CHO) cells are highly susceptible to several RNA viruses including reovirus (Reo), bovine viral diarrhea virus (BVDV), and bovine parainfluenza virus (BPIV) and there have been reports of such viral contaminations. Therefore, viral detection during the CHO cell process is necessary to ensure the safety of biopharmaceuticals against viruses. In this study, a multiplex reverse transcription (RT)-PCR assay was developed and subsequently evaluated for its effectiveness as a means to simultaneously detect Reo, BVDV, and BPIV during the manufacture of cell culture-derived biopharmaceuticals. Specific primers for Reo, BVDV, and BPIV were selected, and a multiplex RT-PCR was optimized. The sensitivity of the assay for simultaneous amplification of all viral target RNAs was 7.76×102 TCID50/ml for Reo,7.44×101 TCID50/ml for BVDV, and 6.75×101 TCID50/ml for BPIV. The multiplex RT-PCR was proven to be very specific to Reo, BVDV, and BPIV and was subsequently applied to the validation of CHO cells artificially infected with each virus. It could detect each viral RNA from CHO cells as well as culture supernatants. Therefore, it was concluded that the multiplex RT-PCR assay can be applied to detection of the adventitious viruses during the manufacture of cell culture-derived biopharmaceuticals.
#Multiplex RT-PCR #CHO cell #reovirus #bovine viral diarrhea virus #bovine parainfluenza virus

목차

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참고문헌 (23)

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Adamson, S. R / 1998 / Experiences of virus, retrovirus, and retrovirus-like particles in Chinese hamster ovary (CHO) and hybridoma cells used for production of protein thera google schola Butler, M / 2005 / Animal cell cultures: recent achievements and perspectives in the production of biopharmaceuticals / Appl. Microbiol. Biotechnol 68 : 283 ~ 291 google schola Caterina, K. M / 2004 / Development of a multiplex PCR for detection of avian adenovirus, avian reovirus, infectious bursal disease virus, and chicken anemia virus / Mol. Cel google schola Collins P. L / 1996 / Parainfluenza Viruses, In Fields Virology, 3rd ed. Vol. 1 / Lippincott-Raven Publishers : 1205 ~ 1243 google schola Collins, M. J. Jr / 1972 / Murine virus contaminants of leukemia viruses and transplantable tumors / J. Natl. Cancer Inst 49 : 1139 ~ 1143 google schola

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