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논문 기본 정보

자료유형
학술저널
저자정보
저널정보
한국미생물생명공학회 Journal of Microbiology and Biotechnology Journal of Microbiology and Biotechnology 제22권 제12호
발행연도
2012.1
수록면
1,776 - 1,781 (6page)

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Multiple viruses such as Lily symptomless virus (LSV),Lily mottle virus (LMoV), and cucumber mosaic virus (CMV) are the most prevalent viruses infecting lilies in Korea. Leaf samples and bulbs showing characteristic symptoms of virus infection were collected from Gangwon,Chungnam, and Jeju provinces of Korea in 2008-2011. Coat protein (CP) genes of LSV and LMoV were amplified from collected samples by reverse transcription-polymerase chain reaction (RT-PCR) and cloned into a pET21d(+)expression vector to generate recombinant CPs. The resulting carboxy-terminal His-tagged CPs were expressed in Escherichia coli strain BL21(DE3) by isopropyl-1-thio-β-D-galactoside induction. The recombinant proteins were purified using Ni-NTA agarose beads, and the purified proteins were used as an immunogen to produce polyclonal antibodies in rabbits. The resulting polyclonal antisera recognized specifically LSV and LMoV from infected plant tissues in Western blotting assays. Indirect enzymelinked immunosorbent assay and immunocapture RTPCR using these polyclonal antisera were developed for the sensitive, efficient, economic, and rapid detection of Lily viruses. These results suggest that large-scale bulb tests and economic detection of Lily viruses in epidemiological studies can be performed routinely using these polyclonal antisera.
#Coat protein #IC-RT-PCR #ID-ELISA #polyclonal antisera

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Asjes, C. J. / 2000 / Control of aphid-borne Lily symptomless virus and Lily mottle virus in Lilium in the Netherlands / Virus Res 71:23~32 google schola Berniak, H. / 2010 / Characterization of polyclonal antibodies raised against two isolates of cucumber mosaic virus / J. Plant Pathol 92:231~234 google schola Beuve, M. / 2007 / A sensitive onestep real-time RT-PCR method for detecting Grapevine leafrollassociated virus 2 variants in grapevine / J. Virol. Methods 141:117~124 google schola Boonham, N. / 2009 / Direct detection of plant viruses in potato tubers usingreal-time PCR / Methods Mol. Biol 508:249~258 google schola Chen, Y. K. / 2001 / High sequence conservation among Cucumber mosaic virus isolates from Lily / Arch. Virol 146:1631~1636 google schola

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