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저자정보
이연근 (축산기술연구소 유전공학과) 박진기 (축산기술연구소 유전공학과) 민관식 (축산기술연구소 유전공학과) 성환후 (축산기술연구소 유전공학과) 임기순 (축산기술연구소 유전공학과) 양병철 (축산기술연구소 유전공학과) 김광식 (축산기술연구소 유전공학과) 김진회 (경상대학교 축산과학부) 장원경 (축산기술연구소 유전공학과)
저널정보
한국동물번식학회 한국동물번식학회 학술대회 한국동물번식학회 2001년도 춘계학술발표대회
발행연도
2001.1
수록면
14 - 14 (1page)

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이 논문의 연구 히스토리 (3)

2002

사람 조혈인자 유전자(Human Erythropoietin Gene)를 도입한 형질전환돼지 생산
이연근 ,  박진기 ,  민관식 외 6명 한국동물번식학회지 2002.01 학술저널

2001

섬유소 분해효소 유전자 도입 형질전환 돼지 생산
이연근 ,  박진기 ,  민관식 외 6명 한국동물번식학회 학술대회 2001.01 학술대회자료
WAP-EPO 유전자 도입 형질전환돼지의 계대번식시 유전자 전이효율에 관한 연구
이연근 ,  박진기 ,  민관식 외 6명 한국동물번식학회 학술대회 2001.01 학술대회자료

초록· 키워드

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본 연구는 생명공학 관련 기술개발에 의하여 신소재 물질을 생산하고 사람에게 안전하고 생리활성이 높은 고가의 의료용 단백질 생산기술을 체계화하며 형질전환 가축을 이용한 유용물질 생산에 따른 산업화와 부가가치의 극대화에 그 목적이 있다. 유즙으로 사람의 빈혈치료제인 EPO(Erythropoietin)를 분비할 수 있는 형질전환돼지를 생산하기 위하여 WAP(Whey Acidic Protein) Promoter(2.6kb) 하류에 사람의 조혈촉진유전자(EPO: 2.6kb)를 연결시켜 미세주입용 재조합 벡터(WAP-EPO : 약 7.8kb)를 구축하였다. 구축된 재조합 벡터를 1세포기 수정란에 약 2ng/ul 농도로 미세주입한 다음 외과적 방법으로 이식하였다. 이식 후 분만 모돈으로부터 생산된 자돈의 꼬리조직을 이용 게놈DNA를 추출하고 PCR 검정을 한 결과, 유즙으로 사람의 빈혈치료제를 생산할 수 있는 유전자가 도입된 형질전환돼지 $\boxDr$새롬이$\boxUl$ (♂)를 확인하였다. 또한 이렇게 꼬리조직으로부터 확인된 새롬이의 혈액과 정액을 채취, 게놈 DNA를 추출하여 외래 유전자 삽입여부를 PCR 방법으로 검정한 결과 꼬리조직과 마찬가지로 혈액 및 정액에서도 외래유전자가 삽입되었음을 확인할 수 있었다. 이렇게 생산된 형질전환돼지 $\boxDr$새롬이$\boxUl$를 이용 계대번식을 통한 F$_1$ 산자의 생산과 유전자 전이율을 확인하기 위하여 $\boxDr$새롬이$\boxUl$정액을 이용한 인공수정을 실시하였다. 인공수정은 1999년 7월 1일부터 2000년 9월 8일 까지 총 78두의 모돈을 이용하였으며, 그 중 21두의 모돈이 분만하여 인공수정에 의한 분만율은 26.92%로 나타났다.(Table Omitted) Table 1에서와 같이 새롬이 정액을 이용한 인공수정에 의해 형질전환된 F$_1$ 자돈의 형질전환율은 17.98%로 나타났으며, 32두의 형질전환자돈 중 8두(암:4두, 수:4두)는 분만과 동시에 폐사하였거나 사육중 폐사하여 현재 24두(암:12두, 수:12두)가 생존하여 F$_1$ 간 교배계획에 의해 사육되고 있다. 이 중 암컷 4두는 현재 F$_2$ 자돈 생산과 함께 유즙내로 사람 빈혈치료제의 분비 유무를 검정중에 있으며, FISH 법에 의한 외래 유전자 삽입 검정을 확인 중에 있다.
#형질전환율 #인공수정 #형질전환돼지 #WAP-EPO

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