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저자정보
원은주 (대구한의대학교 한의과대학 침구경혈학교실) 이봉효 (대구한의대학교 한의과대학 침구경혈학교실) 임성철 (대구한의대학교 한의과대학 침구경혈학교실) 정태영 (대구한의대학교 한의과대학 침구경혈학교실) 서정철 (대구한의대학교 한의과대학 침구경혈학교실) 이경민 (대구한의대학교 한의과대학 침구경혈학교실)
저널정보
대한침구의학회 대한침구의학회지 Journal of acupuncture research 제23권 제3호
발행연도
2006.1
수록면
177 - 190 (14page)

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Objectives : It has long been known about the anticancer effect of GRR-HAS, however, it has not been systemically determined the differentially regulated genes by GRR-HAS in cancer cells. The purpose of this study is to screen the GRR-HAS mediated differentially expressed genes in cancer cells such as HepG2 hepatoma cell lines. Oligonucleotide microarray and proteomic approaches were employed to screen the differential expression genes. Methods : GRR~HAS was prepared by boiling and stored at $-70^{\circ}C$ until use. Cells were treated with various concentrations of GRR-HAS (0.1, 0.5, 1.5, 10, $20mg/m{\ell}$) for 24 h. Cell toxicity was tested by MTT assay. To screen the differentially expressed genes in cancer cells, cells were treated with $1.5mg/m{\ell}$ of GRR-HAS. For oligonucleotide microarray assay, total RNA was used for gene expression analysis using oligonucleotide genechip (Human genome Ul33 Plus 2.0., Affimatrix Co.). For proteomic analysis, total protein was analyzed by 2D gel electrophoresis and Q-TOF mass spectrometer. Results : It has no cytotoxic effects on both HepG2 cells in all concentrations(0.1, 0.5, 1.5, 10,$20mg/m{\ell}$). In oligonucleotide microarray assay, the number of more than twofold differentially regulated known genes was 320 with 6 up-regulated and 314 down-regulated genes in HepG2 cells. In proteomic analysis, three spots were identified by 2D-gel electrophoresis and Q-TOF analysis. One down -regulated protein was protein disulfide isomerase and up-regulated proteins were fatty acid binding protein 1 and 14-3-3 gan1lTIa protein by $1.5mg/m{\ell}$ of CRR-HAS. Discussion : This study showed the comprehensive gene expression analysis using oligonucleotide microarray for the screening of GRR-HAS mediated differentially regulated genes. These results will provide a better application of GRR-HAS in cancer field and drug target development.
#oligonucleotide microarray #CRR-HAS #gene expression #HepG2

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