Bacillus licheniformis로부터 분리된 phospholipase D 유전자의 발현 및 생화학 특성

강한철; 윤상홍; 이창묵; 구본성

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자료유형: 학술저널

저자정보: 강한철 (농촌진흥청, 국립농업과학원, 기능성물질개발과) 윤상홍 (농촌진흥청, 국립농업과학원, 기능성물질개발과) 이창묵 (농촌진흥청, 국립농업과학원, 기능성물질개발과) 구본성 (농촌진흥청, 국립농업과학원, 기능성물질개발과)

저널정보: 한국응용생명화학회 Journal of applied biological chemistry Journal of applied biological chemistry 제54권 제2호

발행연도: 2011.1

수록면: 94 - 100 (7page)

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Bacillus licheniformis로 부터 phospholipase D (PLD)로 추정되는 유전자를 PCR 기술을 이용하여 분리하여 pGEM-T easy 운반체에 cloning 하였다. 분리된 유전자는 His6가 붙은 pET-21 운반체를 이용하여 E. coli BL21 (DE3)에서 발현시켰다. 재 조합된 PLD는 nikel-nitrilotriacetic acid (Ni-NTA) resin을 갖는 column을 이용하여 affinity chromatography로 분리하였다. SDS-PAGE 분석 결과 PLD로 추정되는 단백질은 약 44 kDa의 주요 단일밴드를 나타내었다. 분리된 효소의 최적 활성도는 pH 7.0에서 나타났으며 이 조건에서 또한 효소가 제일 안정되었다. 효소활성에 미치는 최적 온도는 $40-45^{\circ}C$의 온도에서 형성되어 비교적 높은 온도를 나타내었으며 비교적 넓은 범위의 온도에서 상당히 높은 효소 활성도를 나타내었다. 여러 가지 detergent 중에서 Triton X-100을 0.6 mM까지 첨가할 경우 PLD의 효소활성도는 점진적으로 증가하여 대조구 대비 최대 181%의 효소 활성도를 나타내었다.

#Bacillus licheniformis #phospholipase D

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이 논문의 저자 정보

Kang, Han-Chul

소속기관 Department of Agricultural Biotechnology, National Institute of Agricultural Science, Rural Developm

주요연구분야 농수해양학 > 농학

논문수 18 이용수 264

윤상홍

소속기관 Department of metabolic engineering, National Academy of Agricultural Science, Rural Development Adm

주요연구분야 농수해양학 > 농학

논문수 12 이용수 30

이창묵

소속기관 Department of metabolic engineering, National Academy of Agricultural Science, Rural Development Adm

주요연구분야 농수해양학 > 농학

논문수 8 이용수 13

구본성

소속기관 Department of Functional Bio-material, National Academy of Agricultural Science, Rural Development A

주요연구분야 농수해양학 > 농학

논문수 7 이용수 11

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