본 연구에서는 배박으로부터 석세포의 효율적인 대량추출 방법을 모색하고, 석세포 분석법 검증 및 표준화를 위해 분광광도계(UV-spectrophotometer)를 이용하여 밸리데이션을 실시하였다. 석세포를 고순도로 추출하기 위하여 cellulase, hemicellulase, protease등의 활성을 가지는 상업용 효소를 사용하여 추출하였다. 이를 phloroglucinol-HCl 시약으로 염색 후 현미경으로 순도를 확인한 결과, 추출물질 대부분이 붉은색으로 염색되어 고순도로 추출됨을 확인하여, 이를 표준물질로 사용하였다. 석세포를 정량하는 분석법에 있어 가용화하여 UV로 분석하는 여러 개의 방법중, acetyl bromide 분석법에서 25% acetyl bromide 및 30분 반응시간의 조건이 가열배박, 샘플 A, B 석세포의 정량값이 색차계 분석법의 정량값과 일치하여, 석세포 정량분석법으로 적합하였다. 이 분석법이 타당한지 유효성 검증을 위해 특이성, 직선성, 검출한계, 정량한계, 정확성, 정밀성 등을 통하여 평가하였다. 석세포 농도 별로 UV 스펙트럼을 확인하였을 때, 280 nm에서 최대 흡수 파장임을 통해 특이성을 검증하였다. 또한 검량선의 직선성은 상관계수(R2)가 0.997 이상으로 우수하였으며, 검출한계와 정량한계는 각각 0.2944, 0.8921 mg/mL로 확인되었다. 분석법의 재현성 검증은 정밀성 및 정확성 분석에서 RSD는 0.39-3.04%, 회수율은 99.94-100.12%로 AOAC 밸리데이션 가이드라인에 제시된 RSD 기준에 부합하였다. 이러한 결과를 통해 분광광도계를 이용한 석세포의 분석법은 원료표준화를 위한 지표성분 분석법으로 적합하였다. 또한 추후 연구로 배 과일뿐만 아니라 다양한 원료에서 본 연구에서 확립한 분광광도계 이용 석세포 분석법과, 현미경을 이용하여 석세포 개수 및 염색 후 색차를 관찰하는 방법과 비교하여 원료 별 선택성과 효율성을 조사하고자 한다. 본 연구결과를 통해 배박으로부터의 석세포가 산업적으로 활용 가능하며, 배 석세포를 원료로써 제품 개발 및 표준화를 위한 기초자료로 활용될 수 있을 것으로 기대된다. 이는 배 이외에 다양한 원재료(모과, 구아바, 호두, 석류 껍질 등)에 존재하는 석세포를 쉽게 정량화 할 수 있어, 석세포가 존재하는 제품 품질 관리 및 개선 효율성을 향상시키는데 활용될 수 있음을 시사한다.
In this study, we present a spectrophotometer-based quantitative analysis of stone cells extracted with high purity from boiled pomace. Commercial enzyme, including cellulase, hemicellulase, and protease, facilitate extraction. The high purity of stone cells was confirmed using phloroglucinol-hydrochloric acid staining, where most stone cells were stained red, thereby supporting their suitability as standard material. Acetyl bromide analysis, with 25% acetyl bromide and a reaction, duration of 30 min was optimal for stone cell quantification. The specificity of method was verified through maximum absorbance at 280 nm, with excellent linearity (R²≥0.997) in the calibration curve. The detection and quantification limits were 0.2944 and 0.8921 mg/mL, respectively. Precision and accuracy testing yielded a relative standard deviation of 0.39-3.04% and a recovery rate of 99.94-100.12%, thus adhering to the Association of Official Analytical Chemists (AOAC) guidelines. This technology is a first-of-its-kind strategy that uses spectrophotometry for stone cell quantification and shows significant promise for industrial applications in product development and raw material standardization.