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논문 기본 정보

자료유형
학위논문
저자정보

이대훈 (대구가톨릭대학교, 대구가톨릭대학교 대학원)

지도교수
홍주헌
발행연도
2014
저작권
대구가톨릭대학교 논문은 저작권에 의해 보호받습니다.

이용수9

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이 논문의 연구 히스토리 (4)

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This study was conducted to establish efficient extraction method of polysaccharides from Styela plicata and Ascidian tunic and investigate the various physiological properties and functionalities. Among the extraction methods, hot water extract (HE), autoclave extract (AE), and enzyme extract (EE) Styela plicata had a higher yield of polysaccharides as 11.9%, while hot water extraction ascidian tunic a lower as 7.3%. The uronic acid, hexosamine and sulfate-GAGs content of EE was highest of 10.86 g/100g, 33.10 g/100g, 39.72 g/100g investigated, respectively. Composition of amino acids was mainly Leucine, Valine, serine and threonine . fellow by mineral content was Ca>P>K>Mg of Styela plicata and Ascidian tunic. The spectrum of FT-IR showed wavenumber at 3,300∼3,400 cm-1, 2,900 cm-1, 1,650 cm-1 and 820∼850 cm-1 representing the polysaccharide. The decomposition temperature was in the range of 300℃ and showed relatively good enough for their thernal stabilities.
Electron donating abilities, reducing power and tyrosinase activity increased with an increase in extract concentration. The oxygen radical absorbance capacity (ORAC), FRAP activity and ferrous ion chelating effect of Ascidian tunic EE were 364.02 μmole TE/g, 506.09 μM, 32.33%, respectively. Sulfate-polysaccharide was purified from polysaccharide extracted from Styela plicata and Ascidian on DEAE-Sepharose column and screened its functional properties using cell lines. The functionalities of polysaccharide and sulfate-polysaccharide were investigated with RAW264.7 cell lines. The crude polysaccharide and sulfate-polysaccharide purified DEAE-Sepharose Chromatography did not show the toxicity on RAW264.7 cell line in 5∼100 μg/mL, wherease they increased the cell growth rate. The crude polysaccharide and purified sulfate-polysaccharide also increased the production of NO. Particularly, the purified sulfate-polysaccharide inhibited the proliferation human cancer cell lines (HeLa, A549, SNU719). The inhibitory effect of MMP-1 in UV-irradiated human dermal fibroblast was also performed and dependently inhibitory effect on tyrosinase activity in B16F10 cell.

목차

Ⅰ. 서 론 1
Ⅱ. 재료 및 방법 4
1. 재 료 4
2. 다당류의 추출 및 황산다당의 분리 4
2-1 다당류의 추출방법 4
2-2 황산다당의 분리 6
2-3 분리조건 탐색 6
2-3-1 흡수스펙트럼 6
2-3-2 Agarose 전기영동 6
3. 다당류의 이화학적 특성 분석 7
3-1 추출수율 7
3-2 총 당 함량 7
3-3 총 단백질 함량 7
3-4 Uronic acid 함량 7
3-5 Hexosamine 함량 8
3-6 총 Sulfate-GAGs (Glycosaminoglycans) 함량 8
3-7 유리아미노산 분석 8
3-8 무기질 함량 8
3-9 FT-IR 분석 9
3-10 TGA 분석 9
3-11 SDS-PAGE 전기영동 9
4. 다당류의 항산화 활성 분석 10
4-1 ORAC (oxygen radical absorbance capacity) 10
4-2 전자공여능 10
4-3 환원력 10
4-4 FRAP (ferric reducing antioxidant power) 11
4-5 Ferrous ion cheating 11
4-6 Tyrosinase 저해활성 11
5. 생리활성 분석 12
5-1 면역활성 분석 12
5-1-1 대식세포주 배양 12
5-1-2 세포독성 12
5-1-3 Nitric Oxide 함량 12
5-2 항암활성 13
5-2-1 암세포주 배양 13
5-2-2 MTT assay 13
5-3 피부미백 활성 14
5-3-1 멜라노마세포주 배양 14
5-3-2 α-MSH 유도에 의한 Tyrosinase 활성 14
5-4 피부항노화 활성 14
5-4-1 진피섬유아세포주 배양 14
5-4-2 MMP-1 저해활성 측정 15
6. 통계처리 15
Ⅲ. 결과 및 고찰 16
1. 추출조건에 따른 다당류 추출물의 특성 분석 16
1-1 추출수율, 당 함량 및 단백질 함량 16
1-2 Uronic acid 및 hexosamine 함량 17
1-3 총 Sulfate-GAGs (Glycosaminoglycans) 함량 17
1-4 물리화학적 특성 18
1-4-1 유리아미노산 조성 18
1-4-2 무기질 함량 22
1-4-3 FT-IR 분석 23
1-4-4 TGA 분석 26
1-4-5 SDS-PAGE 전기영동 29
1-5 다당류의 항산화 활성 분석 31
1-5-1 ORAC (oxygen radical absorbance capacity) 31
1-5-2 FRAP (ferric reducing antioxidant power) 31
1-5-3 Ferrous ion cheating 효과 32
1-5-4 전자공여능 33
1-5-5 환원력 35
1-5-6 Tyrosinase 저해활성 37
2. 황산다당의 분리 및 정제물의 생리활성 39
2-1 황산다당의 분리 39
2-2 Agarose 전기영동에 의한 황산다당의 확인 42
2-3 황산다당의 면역활성 분석 45
2-3-1 세포독성 45
2-3-2 Nitric Oxide 함량 48
2-4 항암 활성 50
2-5 피부미백 활성 54
2-5-1 MTT assay 54
2-5-2 α-MSH 유도에 의한 Tyrosinase 활성 54
2-6 피부항노화 활성 59
2-6-1 MTT assay 59
2-6-2 MMP-1 저해활성 측정 62
Ⅳ. 요 약 65
Ⅴ. 참고문헌 67

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