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논문 기본 정보
- 자료유형
- 학위논문
- 저자정보
- 지도교수
- Han, Dong Wook
- 발행연도
- 2014
- 저작권
- 부산대학교 논문은 저작권에 의해 보호받습니다.
이용수5
이 논문의 연구 히스토리 (2)
2014
Cell-adhesive RGD peptide-displaying M13 bacteriophage/PLGA nanofiber matrices for growth of fibroblasts
신용철
,
이종호
,
Linhua Jin
외 4명
생체재료학회지
2014.12
학술저널
Cell-adhesive Matrices Composed of RGD Peptide-displaying M13 Bacteriophage/PLGA Hybrid Nanofibers for Application to Tissue Engineering
신용철
인지메카트로닉스공
2014.01
학위논문
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세포외 기질 (Extracellular matrix, ECM)은 조직 내 또는 세포외 공간을 채우고 있는 생체고분자의 복합체로서, 세포의 증식, 분열, 이동 및 분화 등을 조절하며 세포의 생존에 직접적으로 관여하는 매우 중요한 망상 구조체이다. 따라서 최근 생체재료를 이용하여 인공 세포외 기질을 제작하기 위한 연구가 많이 진행되고 있다. M13 박테리오파지 (M13 bacteriophage)는 독성이 없으며, 나노섬유와 유사한 형태의 박테리오파지이다. M13 박테리오파지는 형태적인 특성으로 인해 나노섬유로 제작하기 용이하며, 표면에 원하는 단백질을 발현시킬 수 있다는 장점이 있다. 이번 연구에서는 M13 박테리오파지를 유전공학을 통해 표면에 RGD 순서를 발현시켜 세포부착 활성을 띄게 하였다. M13 박테리오파지의 표면에 발현된 RGD 순서는 피브로넥틴, 라미닌, 콜라겐 등과 같은 세포부착에 관여하는 단백질에 존재하는 펩티드로서, 아르기닌, 글리신, 아스파르트산으로 구성되어 있다. 이러한 RGD 순서는 세포부착 활성을 담당하며 세포 증식과 이동, 분화 등을 촉진하는 역할을 한다. 특히 초점접착역 (focal adhesion)에 직접적으로 관여하며 세포부착 수용체인 인테그린 (integrin)이 결합하는 부위이다. 또한, Poly (D, L)-lactide-co-glycolide (PLGA)는 생체 적합성이 우수하고, 세포외 기질을 제작하는데 적합한 생화학적 특성을 가지는 생분해성 고분자이다. 뿐만 아니라, 다양한 유기용매에 용해되기 때문에 전기방사에 이용되는 대표적인 고분자이다. 따라서 본 연구에서는 RGD 순서가 발현된 M13 박테리오파지 (RGD-M13 파지)와 생분해성 고분자인 PLGA를 혼합하여 전기방사법을 이용해 혼합 나노섬유를 형성한 뒤, 세포외 기질과 유사한 지지체를 제작하는데 중점을 두었다. 우선 RGD-M13 파지와 PLGA를 혼합하여 전기방사법을 통해 세포외 기질과 구조적으로 유사하며 뛰어난 생체적합성을 지니는 나노섬유로 이루어진 기질 (matrix)을 제작하였다. 제작한 기질은 주사전자현미경 (scanning electron microscopy, SEM), 원자력현미경 (atomic force microscopy, AFM), 푸리에변환 적외분광법 (Fourier transform infrared spectroscopy), 라만 분광법 (raman spectroscopy), 접촉각 측정, 면역형광법 등을 이용하여 특성을 측정하였다. 또한 다양한 종류의 세포를 기질에 배양하여 CCK-8 assay를 통해 세포부착력과 세포 증식 정도를 측정하였다. 그 결과, RGD-M13 파지/PLGA 혼합 기질이 세포부착력과 세포 증식을 증가시킨다는 것을 확인 하였으며, 조직공학용 지지체로서 사용되기에 적합한 생화학적 특성을 지니는 것을 확인 하였다. 따라서 RGD-M13 파지/PLGA 혼합 기질은 조직공학용 지지체의 역할을 충분히 해낼 수 있을 것이라 판단된다.
목차
1. Introduction 12. Experimental section 52.1 Genetic engineering of M13 bacteriophage 52.2 Fabrication of RGD-M13 phage/PLGA nanofibers by electrospinning 52.3 Physicochemical characterization of RGD-M13 phage/PLGA matrices 62.4 Cell culture 72.5 Immunofluorescence staining 82.6 Determination of cellular attachment and proliferation 93. Results and Discussion 113.1 Fabrication of RGD-M13 phage/PLGA nanofibers by electrospinning 113.2 Physicochemical characterization of RGD-M13 phage/PLGA matrices 153.3 Immunofluorescence staining of RGD-M13 phage/PLGA nanofibers 263.4 Cellular behavior analysis 294. Conclusion 455. References 46Abstract 50
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