본 연구에서는 카드뮴 (Cadmium)으로 유발된 산화적 스트레스에 대한 태충혈과 신수혈 침 자극의 간과 신장 보호 효과를 알아보고자 시행하였다. 체중 150±30 g의 Sprague-Dawley 4주령 수컷의 흰 쥐를 이용하여 일주일동안 안정시킨 후 카드뮴을 투여하지 않은 정상군, 카드뮴 투여 대조군, 카드뮴 투여 후 태충혈에 침 자극한 태충혈군, 카드뮴 투여 후 신수혈에 침 자극한 신수혈군, 카드뮴 투여 후 꼬리에 침 자극한 꼬리침군으로 나누었다. 카드뮴은 2 ㎎/㎏을 1일 2회 오전, 오후 연속으로 3일간 경구로 투여하였고, 침 자극은 주 5회 2주간 실시하는데, 자극의 깊이는 1 ㎜ 직각으로 자입하여 1분 동안 1초당 2번 염전하였다. 침 자극의 마지막 날에 간과 신장을 적출하여 무게를 재고, alanine transaminase (ALT), aspartate aminotransferase (AST), blood urea nitrogen (BUN)을 통해 간과 신장의 기능을 확인하였으며, 혈청과 간, 신장 조직에서의 활성산소를 측정하고 superoxide dismutase (SOD), catalase, glutathione peroxidase (Gpx), nuclear factor erythroid derived 2-related factor 2 (Nrf-2), heme oxygenase-1 (HO-1), nuclear factor-κB (NF-κB), cyclooxygenase-2 (COX-2), inducible nitric oxide synthase (iNOS), Bax, Cytochrome c 발현량을 비교하였다. 태충혈군과 신수혈군은 대조군에 비해 카드뮴 투여 후 감소된 체중과 조직의 무게를 유의하게 증가시키고, 증가된 ALT와 BUN 수치는 유의하게 감소시켰다. 또한 산화적 스트레스에 대해 대조군과 비교하여 유의한 활성산소의 감소를 나타내며 항산화, 항염증, 세포사멸 보호 효과를 나타냈고, 신수혈이 태충혈보다 더 유의한 효과를 나타내었다.
This study was performed to investigate the protective effects of acupuncture on the liver and kidney in the oxidative stress caused by cadmium accumulation. Sprague-Dawley male (150±30 g) rats were stablized for a week and divided into 5 groups which is normal, control, LR3 acupuncture, BL23 acupuncture and sham acupuncture group. For three days experimental groups were received oral doses of cadmium 2 ㎎/㎏ twice a day. Acupuncture was given bilaterally at each point 10 times for two weeks. The depth of stimulation was 2~3 ㎜ at right angles and torsion of acupuncture was produced 2 times per second for 5 minutes. The liver and kidney were shipped off and taken weight at the last day of two weeks, and hepatic and renal functions were confirmed through alanine transaminase (ALT), aspartate aminotransferase (AST), blood urea nitrogen (BUN). We measured reactive oxygen species of serum, liver and kidney, and compared expression levels of superoxide dismutase (SOD), catalase, glutathione peroxidase (Gpx), nuclear factor erythroid derived 2-related factor 2 (Nrf-2), heme oxygenase-1 (HO-1), nuclear factor- κB (NF-κB), cyclooxygenase-2 (COX-2), inducible nitric oxide synthase (iNOS), Bax and Cytochrome c. LR3 acupuncture group and BL23 acupuncture group significantly increased body, liver and kidney weight, and decreased ALT and BUN compared to control group. For the oxidative stress, LR3 acupuncture group and BL23 acupuncture group significantly reduced reactive oxygen species compared to control group and showed the effects of antioxidant, anti-inflammatory and apoptosis protection. BL23 acupuncture group was more effective than LR3 acupuncture group.
목차
I. 서 론 1Ⅱ. 재료 및 방법 31. 재료 31) 동물 32) 침 33) 시약 32. 방법 41) 군 분류 42) 침 자극 43) 카드뮴 축적 흰 쥐 모델 54) 체중 및 장기 무게 측정 55) 혈청 분석 56) 간과 신장의 ROS 생성량 측정 67) Cytosol extract 68) Nuclear extract 69) Western blot analysis 710) 통계처리 8Ⅲ. 결 과 91. 체중, 간과 신장 무게에 미치는 영향 92. 간과 신장 기능에 미치는 영향 113. 산화적 스트레스 억제 효과 134. 간과 신장 조직에서 항산화 효소 관련 단백질의 발현에 미치는 영향 155. 간과 신장 조직에서 항산화 유전자 관련 단백질의 발현에 미치는 영향 186. 간과 신장 조직에서 염증 관련 단백질의 발현에 미치는 영향 217. 간과 신장 조직에서 세포사멸 관련 단백질의 발현에 미치는 영향 24Ⅳ. 고 찰 27Ⅴ. 결 론 35참고문헌 37국문초록 48Abstract 50