淸熱瀉濕湯은 濕熱로 일어나는 濕熱脚氣 腫痛諸證에 사용하는 처방이며, 白屈菜는 消腫鎭痛, 止咳 등의 효능이 있으며, 金銀花는 淸熱解毒, 散風熱 등의 효능이 있으며, 蒲公英은 淸熱解毒, 消癰散結하는 효능이 있다. 이에 저자는 淸熱瀉濕湯에 白屈菜, 金銀花, 蒲公英을 가미한 加味淸熱瀉濕湯의 치료 효과를 실험적으로 입증하고자 급성 염증?통증 모델에서는 랫트에 자이모산으로 통증을 유발하여 진통 작용을 측정하고, 만성 류마티스 관절염 모델에서는 마우스에 콜라겐으로 관절염을 유발하고 관절부위의 부종 증가율 및 비장에 미치는 영향, 관절의 조직학적 변화, 혈액학적 소견의 변화를 측정하였다. 그 결과 加味淸熱瀉濕湯은 급성 염증?통증 모델에서 진통효과를 보였으며, 척수 내의 통증 조절인자인 신경세포, 교세포 및 protein kinase A 및 C의 활성을 감소시켰다. 만성 류마티스 관절염 모델에서는 관절염 지수, 관절 부종, 비장 비대, 비장의 유착률을 감소시켰으며, 조직학적 분석결과 연골 파괴와 활막 증식을 억제하고 혈청 내 IgG2a, IgG2b, IgM, anti-collagen II IgG, TNF-α, IL-1β의 농도를 감소시켰다. 이상의 결과를 종합하면, 加味淸熱瀉濕湯은 관절염에서 나타나는 통증에 대한 우수한 진통 효과가 있으며 만성 류마티스 관절염에서 관절염 유발물질을 억제하는 효과가 있는 것으로 판단된다.
Objectives: This study was carried out to find the effects of Gami- cheongyulsaseub-tang(hereinafter referred to GCST) on the inhibition of zymosan-induced pain in rats and collagen II-induced arthritis(CIA) in DBA/1J mouse. Methods: As an acute inflammatory pain model, peripheral inflammation was induced by intraplantar injection of zymosan into the right hind paw in rats and then the hyperalgesia and pain regulating factors in spinal cord were analyzed. As a chronic inflammation model, the mixture of collagen II and complete Freund’s adjuvant was treated into mice to establish rheumatoid arthritis and then body weight, thickness of hind paw, pathological change of spleen, immunological rheumatoid factor(IgG1, IgG2a, IgG2b, IgM and anti-collagen II), pro-inflammatory cytokines, and bone injury were analyzed. Results: In the acute inflammatory pain model, GCST significantly inhibited the thermal and mechanical hyperalgesia and the pain regulating factors, including Fos, CD11b, PKA and PKC, in the spinal cord with a dose-dependent manner. In the chronic rheumatoid arthritis model, GCST administration decreased arthritic index and paw edema as compared with CIA control group. In particular, GCST reduced significantly the serum levels of total IgG2a, IgG2b, IgM, and specific anti-collagen II, but not total IgG1. GCST also resulted in the attenuation of bone injury and spleen enlargement/adhesion in CIA mice. Moreover, the secretion of pro-inflammatory cytokines TNF-α and IL-1β in CIA mice was significantly reduced by GCST in a dose-dependent manner. Conclusions: Comparison of the results in this study showed that GCST had anti-nociceptive and immunomodulatory effects. These data imply that GCST can be used as an effective drug for not only rheumatoid arthritic pain but also other auto-immune diseases.
목차
Ⅰ. 서론 1Ⅱ. 재료 및 방법 31. 재료 31) 약재 32) 시료 추출 43) 실험동물 및 사육조건 44) 기기 42. 방법 61) 급성 염증?통증 모델 및 시료 투여 62) 진통 효능의 측정 63) 척수 내 통증인자의 면역학적 염색 74) 만성 관절염 동물 모델 및 시료 투여 75) 체중 측정 86) 관절염 지수 측정 87) 관절의 외형 관찰 및 부종의 측정 98) 조직학적 검사 99) 혈청 분리 1010) 혈청 중 면역글로불린 IgG1 함량 측정 1011) 혈청 중 면역글로불린 IgG2a 함량 측정 1112) 혈청 중 면역글로불린 IgG2b 함량 측정 1113) 혈청 중 면역글로불린 IgM 함량 측정 1214) 혈청 중 Anti-collagen Ⅱ IgG 함량 측정 1215) 혈청 중 TNF-α 함량 측정 1316) 혈청 중 IL-1β 함량 측정 1317) 통계분석 13Ⅲ. 결과 151. 급성 염증?통증 모델 151) 급성 염증?통증 모델에서 진통 효과 152) 척수 내 통증인자에 미치는 영향 182. 만성 류마티스 관절염 모델 201) 체중에 미치는 영향 202) 관절염 지수에 미치는 영향 213) 관절의 외형과 부종에 미치는 영향 224) 비장의 크기에 미치는 영향 245) 비장 유착률에 미치는 영향 266) 관절 조직의 염색 소견 277) 혈청 중 IgG1 농도에 미치는 영향 288) 혈청 중 IgG2a 농도에 미치는 영향 299) 혈청 중 IgG2b 농도에 미치는 영향 3010) 혈청 중 IgM 농도에 미치는 영향 3111) 혈청 중 Anti-collagen Ⅱ IgG 농도에 미치는 영향 3212) 혈청 중 TNF-α 농도에 미치는 영향 3313) 혈청 중 IL-1β 농도에 미치는 영향 34Ⅳ. 고찰 35Ⅴ. 결론 41