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논문 기본 정보
- 자료유형
- 학위논문
- 저자정보
- 지도교수
- 유용욱
- 발행연도
- 2015
- 저작권
- 원광대학교 논문은 저작권에 의해 보호받습니다.
이용수14
이 논문의 연구 히스토리 (2)
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본 연구에서는 어성초 추출물이 Streptococcus mutans (S. mutans)의 치아 우식 활성을 억제하는데 효과가 있는지를 조사하였다. 어성초가 세포생존율에 미치는 영향을 측정한 후, S. mutans의 성장, 산생성, 부착 능력 및 dental biofilm 형성 억제 효과를 평가하였다. 또한 Real-time PCR분석을 통한 유전자 독력인자 발현 억제 효과를 확인하였으며, 다음과 같은 연구 결과를 얻었다.
1. RAW 264.7 세포에 어성초 추출물을 처리하여 독성 유무를 측정한 결과 0.2 mg/mL 이하의 농도에서 유의한 생존율 감소는 나타나지 않았으며, 그러므로 세포독성은 없는 것으로 판단하였다.
2. 어성초 추출물의 S. mutans 성장억제 효과에서는 0.02 mg/mL 이상의 농도에서 대조군에 비하여 통계적으로 유의한 차이를 보였다(p<0.05). 또한, 산생성 억제 효과는 0.03 mg/mL 이상을 첨가하였을 때부터 유의한 차이를 보였다.
3. S. mutans의 S-HA(Saliva-coated hydroxyapatite beads)에 대한 부착율은 어성초 추출물의 농도가 높아질수록 억제됨을 확인할 수 있었다.
4. S. mutans의 biofilm 형성 억제율은 어성초 추출물의 농도가 높아질수록 억제됨을 확인할 수 있었다.
5. 주사현미경(scanning electron microscope)과 공초점 레이저 현미경(confocal laser scanning microscopy)을 이용한 관찰에서도 첨가한 어성초 추출물의 농도가 높아질수록 S. mutans biofilm 생성 억제 효과 및 살균 효과가 관찰되었다.
6. Real-time PCR분석을 통한 S. mutans의 유전자 독력인자 발현 억제정도는 GTFase B, C, D를 합성하는 유전자 gtfB, gtfC, gtfD 의 발현이 sub-MIC 수준에서 감소하였고, 부착에 관여하는 유전자 spaP, gbpB의 발현도 역시 sub-MIC 수준에서 감소하였다 S. mutans의 glucose uptake system인 glucose phosphotransferase system(PTS)의 조절 및 산내성에도 기여하는 유전자 relA가 sub-MIC 수준에서 감소하였고, 산내성에도 기여하는 유전자 brpA도 sub-MIC 수준에서 감소하였다. gbpB, gtfB, gtfC, gtfD의 발현을 조절하는 virR도 발현이 sub-MIC 수준에서 감소하였다.
7. 정성실험을 통해 어성초의 성분을 검사한 결과, 어성초에는 alkaloids, phenolic compounds, flavonoids, glycosides, peptides, organic acids 등이 포함되었으며, 성분 물질 중에서 flavonoids, glycosides, peptides 와 organic acids는 그 반응이 상대적으로 현저한 결과를 나타내었으므로 어성초 에탄올 추출물 가운데 그 성분이 상당히 포함되었다고 볼 수 있다.
이상의 결과를 토대로 하여 볼 때, 어성초 추출물은 S. mutans의 성장 억제, 유기산의 생성 억제, S-HA에 대한 부착억제, S. mutans의 biofilm 생성 억제, 전자 현미경을 통해 확인한 S. mutans의 biofilm 생성억제 억제 S. mutans 유전자 독력인자 발현 억제에 효과가 있음을 알 수 있었다. 이를 통해 항치아우식 예방제로서 사용을 기대할 수 있을 것으로 보인다.
1. RAW 264.7 세포에 어성초 추출물을 처리하여 독성 유무를 측정한 결과 0.2 mg/mL 이하의 농도에서 유의한 생존율 감소는 나타나지 않았으며, 그러므로 세포독성은 없는 것으로 판단하였다.
2. 어성초 추출물의 S. mutans 성장억제 효과에서는 0.02 mg/mL 이상의 농도에서 대조군에 비하여 통계적으로 유의한 차이를 보였다(p<0.05). 또한, 산생성 억제 효과는 0.03 mg/mL 이상을 첨가하였을 때부터 유의한 차이를 보였다.
3. S. mutans의 S-HA(Saliva-coated hydroxyapatite beads)에 대한 부착율은 어성초 추출물의 농도가 높아질수록 억제됨을 확인할 수 있었다.
4. S. mutans의 biofilm 형성 억제율은 어성초 추출물의 농도가 높아질수록 억제됨을 확인할 수 있었다.
5. 주사현미경(scanning electron microscope)과 공초점 레이저 현미경(confocal laser scanning microscopy)을 이용한 관찰에서도 첨가한 어성초 추출물의 농도가 높아질수록 S. mutans biofilm 생성 억제 효과 및 살균 효과가 관찰되었다.
6. Real-time PCR분석을 통한 S. mutans의 유전자 독력인자 발현 억제정도는 GTFase B, C, D를 합성하는 유전자 gtfB, gtfC, gtfD 의 발현이 sub-MIC 수준에서 감소하였고, 부착에 관여하는 유전자 spaP, gbpB의 발현도 역시 sub-MIC 수준에서 감소하였다 S. mutans의 glucose uptake system인 glucose phosphotransferase system(PTS)의 조절 및 산내성에도 기여하는 유전자 relA가 sub-MIC 수준에서 감소하였고, 산내성에도 기여하는 유전자 brpA도 sub-MIC 수준에서 감소하였다. gbpB, gtfB, gtfC, gtfD의 발현을 조절하는 virR도 발현이 sub-MIC 수준에서 감소하였다.
7. 정성실험을 통해 어성초의 성분을 검사한 결과, 어성초에는 alkaloids, phenolic compounds, flavonoids, glycosides, peptides, organic acids 등이 포함되었으며, 성분 물질 중에서 flavonoids, glycosides, peptides 와 organic acids는 그 반응이 상대적으로 현저한 결과를 나타내었으므로 어성초 에탄올 추출물 가운데 그 성분이 상당히 포함되었다고 볼 수 있다.
이상의 결과를 토대로 하여 볼 때, 어성초 추출물은 S. mutans의 성장 억제, 유기산의 생성 억제, S-HA에 대한 부착억제, S. mutans의 biofilm 생성 억제, 전자 현미경을 통해 확인한 S. mutans의 biofilm 생성억제 억제 S. mutans 유전자 독력인자 발현 억제에 효과가 있음을 알 수 있었다. 이를 통해 항치아우식 예방제로서 사용을 기대할 수 있을 것으로 보인다.
목차
Ⅰ. 서 론 1Ⅱ. 재료 및 방법 5Ⅲ. 결 과 13Ⅳ. 고 찰 24Ⅴ. 결 론 28
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