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논문 기본 정보

자료유형
학위논문
저자정보

김정환 (호서대학교, 호서대학교 일반대학원)

지도교수
이진영
발행연도
2015
저작권
호서대학교 논문은 저작권에 의해 보호받습니다.

이용수11

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이 논문의 연구 히스토리 (2)

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Experimental Study of Extracts from Dioscorea bulbifera on Anti-Inflammatory Action Mechanism

Jeung Hoan Kim

Department of Cosmetic Science The Graduate School
Hoseo University
Asan, Korea

( Supervised by professor Jin-Young Lee )

Dioscorea bulbifera has been cultivated in Korea, China and Japan as a food, and also widely used as a traditional medicine for a long time. Several biological activities, including anti-cancer, anti-thrombotic, anti-viral, hemolytic, hypercholesterolemic and hypoglycemic, have been reported.
This study aimed to investigate the enhancement of cosmeceutical activities of Dioscorea bulbifera by different extraction processes. The extracts were classified as follows: WE (water extract at 100℃,control), USEE (70% ethanol extract process for 24 hours after ultrasonification for 6 hours at 60℃), HPEE (high pressure for 12 hours at 60℃ whith 70% ethanol). Compared to the WE, total phenolic compounds contents in the EE, UEE and HPEE were increased to 134.2%, 139.5 % and 162.9% respectively. The HPEE showed the highest activity in 1,1-diphenyl- 2-picryl-hydrazyl (DPPH) radical scavenging, 2, 2'' - azinobis (3 ?ethylbenzothiazoline?6-sulfonic acid; ABTS) radical cation decolorization, inhibition activity of xanthine oxidase and superoxide dismutase (SOD)-like test, respectively. Allantoin concentrations of WE, EE, USEE and HPEE was measured as 6.28 mg/g, 13.54 mg/g, 15.75 mg/g and 17.17 mg/g, respectively. The HPEE showed the highest concentration diosgenin. It has been reported that diosgenin has anti-inflammatory effect through inhibition of macrophage-derived inflammatory mediators. Therefore, we evaluated the inhibitory effect of HPEE on production or expression of inflammatory mediators in various cells. The inhibitory effects of HPEE on LPS-induced production of IL-4 and IFN-γ, and expression of COX-II and IL-12 were investigated in the activated Jurkat cells. And the production of β-hexosaminidase was investigated in RBL-2H3 cells. Also, the effect of HPEE on LPS-induced production of TNF-α and PGE2, and expression of COX-II, iNOS and TNF-α were investigated in the activated RAW264.7 cells. HPEE significantly inhibited the production and suppressed the expression of pro-inflammatory mediators. Finally, we evaluated the inhibitory effect of HPEE on an atopic dermatitis-like mouse model. An atopic dermatitis-like skin lesion was induced by repeated treatment of 2,4-dinitrochlorobenzene (DNCB) on the ear skin of ICR mice. The efficacy of HPEE was tested by histopathologic analysis. Histopathologic analysis revealed a reduction in the ear thickness in the HPEE group. These results show that extract of Dioscorea bulbifera may explain some known biological activities including anti-inflammatory effect, and is of considerable benefit in the treatment for pro-inflammatory cytokine overproduction related immunological diseases.

목차

국문요약 Ⅴ
List of Tables Ⅶ
List of figures Ⅷ
Ⅰ. 서 론 1
1. 연구의 배경 1
2. 연구의 목적 5
Ⅱ. 재료 및 방법 10
1. 시약 및 재료 10
2. 추출공정별 둥근마 추출물의 제조 11
3. Phenol성 물질의 정량 및 유효성분 분석 13
4. Electronic donation ability 측정 15
5. ABTS radical cation decolorization 측정 15
6. SOD like activity 측정 16
7. Xanthine oxidase inhibition activity 측정 16
8. 둥근마 추출물 및 주요성분의 항염증 효과 측정 17
가. T세포주에서 세포 생존율(cell viability) 측정 17
나. T세포에서의 IL-4 및 IFN-γ의 분비능 측정 실험 17
다. T세포 분화 유도세포에서의 Th2 분화 억제 효과 17
라. 비만세포/대식세포의 배양 18
마. 대식세포주에서 세포 생존률 (cell viability) 실험 18
바. 비만세포에서 β-hexosaminidase 방출량 측정 18
사. 대식세포에서 알러지 유도 사이토카인 및 염증유발물질 분비억제효과 평가 19
아. 전사수준에서 대식세포의 알러지 유도 사이토카인 및 화학물질 분비억제효과 평가 19
자. 신호전달과정 검토 20
9. 동물실험 21
가. 실험동물 21
가. 실험계획 및 시료투여 21
나. 알레르기 유발과 조직변화 측정 22
10. 통계처리 22
Ⅲ. 실험 결과 및 고찰 23
1. 추출공정별 Total phenolic compounds 함량 23
2. 추출공정별 항산화 활성 25
3. 추출공정별 둥근마 추출물의 주요성분 함량 33
4. 둥근마 추출물의 항염증 효과 측정 36
가. T세포주에서 세포 생존율(cell viability) 측정 36
나. T세포에서의 IL-4 및 IFN-γ의 분비능 측정 실험 39
다. T세포 분화 유도세포에서의 Th2 분화 억제 효과 43
라. 대식세포주에서 세포 생존률 (cell viability) 실험 45
마. 비만세포에서 β-hexosaminidase 방출량 측정 47
바. 대식세포에서 알러지 유도 사이토카인 및 염증유발물질 분비억제효과 평가 49
사. 전사수준에서 대식세포의 알러지 유도 사이토카인 및 화학물질 분비억제효과 평가 53
아. 신호전달 과정 검토 결과 55
5. Allantoin과 Diosgenin의 항염증 효과 57
가. T세포주에서 세포 생존율(cell viability) 57
나. T세포에서의 IL-4 및 IFN-γ의 분비능 57
다. T세포 분화 유도세포에서의 Th2 분화 억제 효과 61
라. 대식세포주에서 세포 생존률 (cell viability) 61
마. 비만세포에서 β-hexosaminidase 방출량 61
바. 대식세포에서 알러지 유도 사이토카인 및 염증유발물질 분비억제효과 평가 65
사. 전사수준에서 대식세포의 알러지 유도 사이토카인 및 화학물질 분비억제효과 평가 65
아. 신호전달과정 검토 65
6. 동물실험 결과 70
Ⅳ. 결 론 72
참고문헌 74
영문초록 92

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