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논문 기본 정보
- 자료유형
- 학위논문
- 저자정보
- 지도교수
- 안성관
- 발행연도
- 2015
- 저작권
- 건국대학교 논문은 저작권에 의해 보호받습니다.
이용수18
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α-Mangostin에 의한 각질세포 분화 촉진, 피부노화 억제 및 손톱 윤기 개선 효과
α-mangostin은 망고스틴 과피에 함유되어 있는 가장 풍부한 크산톤(Xanthone)으로 항암, 항균, 항알레르기 연구 등이 알려져 있다. 그러나 각질형성세포에 대한 연구는 미비하여 본 연구를 통해 UVB를 조사한 인간 각질형성세포(Human, Adult, low Calcium, high Temperature; HaCaT cells, Keratinocytes)에서 α-mangostin에 의한 각질세포 분화 촉진 및 피부노화 억제 효과를 확인하였다. α-mangostin의 효능평가는 세포 생존율, 활성산소 측정, 세포주기분석, 노화세포 분석, 유전자 발현 분석과 같은 세포내 기전 연구를 통해 이루어졌다. 먼저, 세포생존율 분석을 통해 UVB에 의해서 감소된 세포 생존율이 α-mangostin 농도 의존적으로 증가한 것을 확인하였다. 이어 quantitative real-time PCR을 통해 유전자의 발현양을 측정한 결과 UVB에 의해 HaCaT 세포 내에서 활성이 증가한 p53이 α-mangostin의 농도가 높을수록 발현이 감소하였고 p53에 의해 조절되는 하위 유전자인 14-3-3σ, p21, p16, cyclin B의 양도 α-mangostin 농도 의존적으로 발현이 조절되는 것을 확인하였다. UVB를 조사한 각질형성세포의 세포주기에 α-mangostin이 미치는 영향을 확인한 결과 α-mangostin을 처리했을 때 UVB를 조사하지 않은 대조군의 세포주기와 유사한 수치로 회복되는 것을 확인하였다. 또한 세포내 ROS 소거능은 양성대조군인 NAC과 α-mangostin이 거의 동일한 수치를 나타냈고 노화 세포 수를 측정하는 SA-β-galactosidase 시험결과 α-mangostin 농도 의존적으로 UVB에 의해 유도되는 세포노화가 감소한 것으로 확인하였다. 각질형성세포의 주요한 초기 분화 biomaker인 keratin 1, 2와 후기 분화 biomaker인 involucrin, loricrin의 발현 변화를 확인한 결과 α-mangostin 처리 시 keratin 1, 2와 involucrin, loricrin의 발현이 현저하게 증가하였고 이러한 결과로 말미암아 α-mangostin이 각질형성세포의 분화를 촉진하는 효과가 있음을 확인하였다. 본 연구는 각질형성세포의 또 다른 분화 결과로 각질층에서 보이는 단단하고 반투명한 각질 판인 손톱을 이용한 인체적용시험을 실시하였다. α-mangostin을 유효성분으로 제조한 크림을 이용하여 4주간 근위손톱주름을 포함한 손톱에 적용한 결과 손톱의 윤기가 5.3% 개선되어 α-mangostin이 손톱 윤기에도 효능이 있음을 확인하였다. 이러한 결과를 통해 α-mangostin이 항산화·항노화 및 각질세포의 분화 촉진효과와 손톱 윤기 개선에 효과가 있음을 확인하였고 화장품 원료로써 가능성을 확인하였다.
α-mangostin은 망고스틴 과피에 함유되어 있는 가장 풍부한 크산톤(Xanthone)으로 항암, 항균, 항알레르기 연구 등이 알려져 있다. 그러나 각질형성세포에 대한 연구는 미비하여 본 연구를 통해 UVB를 조사한 인간 각질형성세포(Human, Adult, low Calcium, high Temperature; HaCaT cells, Keratinocytes)에서 α-mangostin에 의한 각질세포 분화 촉진 및 피부노화 억제 효과를 확인하였다. α-mangostin의 효능평가는 세포 생존율, 활성산소 측정, 세포주기분석, 노화세포 분석, 유전자 발현 분석과 같은 세포내 기전 연구를 통해 이루어졌다. 먼저, 세포생존율 분석을 통해 UVB에 의해서 감소된 세포 생존율이 α-mangostin 농도 의존적으로 증가한 것을 확인하였다. 이어 quantitative real-time PCR을 통해 유전자의 발현양을 측정한 결과 UVB에 의해 HaCaT 세포 내에서 활성이 증가한 p53이 α-mangostin의 농도가 높을수록 발현이 감소하였고 p53에 의해 조절되는 하위 유전자인 14-3-3σ, p21, p16, cyclin B의 양도 α-mangostin 농도 의존적으로 발현이 조절되는 것을 확인하였다. UVB를 조사한 각질형성세포의 세포주기에 α-mangostin이 미치는 영향을 확인한 결과 α-mangostin을 처리했을 때 UVB를 조사하지 않은 대조군의 세포주기와 유사한 수치로 회복되는 것을 확인하였다. 또한 세포내 ROS 소거능은 양성대조군인 NAC과 α-mangostin이 거의 동일한 수치를 나타냈고 노화 세포 수를 측정하는 SA-β-galactosidase 시험결과 α-mangostin 농도 의존적으로 UVB에 의해 유도되는 세포노화가 감소한 것으로 확인하였다. 각질형성세포의 주요한 초기 분화 biomaker인 keratin 1, 2와 후기 분화 biomaker인 involucrin, loricrin의 발현 변화를 확인한 결과 α-mangostin 처리 시 keratin 1, 2와 involucrin, loricrin의 발현이 현저하게 증가하였고 이러한 결과로 말미암아 α-mangostin이 각질형성세포의 분화를 촉진하는 효과가 있음을 확인하였다. 본 연구는 각질형성세포의 또 다른 분화 결과로 각질층에서 보이는 단단하고 반투명한 각질 판인 손톱을 이용한 인체적용시험을 실시하였다. α-mangostin을 유효성분으로 제조한 크림을 이용하여 4주간 근위손톱주름을 포함한 손톱에 적용한 결과 손톱의 윤기가 5.3% 개선되어 α-mangostin이 손톱 윤기에도 효능이 있음을 확인하였다. 이러한 결과를 통해 α-mangostin이 항산화·항노화 및 각질세포의 분화 촉진효과와 손톱 윤기 개선에 효과가 있음을 확인하였고 화장품 원료로써 가능성을 확인하였다.
목차
I. 서론 1II. 연구 재료 및 방법 61. 세포효력시험 61. 세포 배양 62. 시료 처리 63. Cell viability 측정 74. 활성산소 측정 75. p53 siRNA 86. Cell cycle analysis . 87. 세포노화 측정 98. Quantitative real-time PCR 99. 통계처리 112. 인체적용시험 121. 시험 기간 122. 시험 방법 123. 시험물질로 사용된 화장품 조성 124. 손톱 윤기 측정 13III. 연구 결과 141. α-Mangostin의 Cell cycle arrest 억제 효과 141. 세포 독성 142. UVB에 의한 세포 손상 억제 163. p53 발현 억제 184. 14-3-3σ 발현 억제 205. p21 발현 억제 226. Cyclin B 발현 억제 247. p16 발현 억제 268. Cell cycle에 미치는 영향 289. ROS 제거 효과 3010. 세포 노화 억제 322. α-Mangostin의 각질세포 분화 촉진 효과 341. Keratin 1과 Keratin 2의 발현 촉진 342. Involucrin과 Loricrin의 발현 촉진 373. α-Mangostin이 함유된 크림에 의한 손톱윤기 개선 효과 40IV. 고찰 421. α-Mangostin의 세포주기 조절에 의한 피부 노화 억제 기전 422. α-Mangostin에 의한 각질세포 분화 촉진 효과 453. α-Mangostin에 의한 손톱윤기 개선 효과 47V. 결론 49참고문헌 50국문초록 63
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