과잉치 분류에 따른 치수유래줄기세포 계대배양 시간의 연관성 :Relationship with Passage Time of Human Dental Pulp Stem Cells from Supernumerary Tooth by Classification

신요섭

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자료유형: 학위논문

저자정보: 신요섭 (단국대학교, 단국대학교 치의학 대학원)

지도교수: 김종수

발행연도: 2016

저작권: 단국대학교 논문은 저작권에 의해 보호받습니다.

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이 논문의 연구 히스토리 (2)

2016

과잉치 분류에 따른 치수유래줄기세포 계대배양 시간의 연관성

신요섭 치의학과 소아치과학 전공 2016.01 학위논문

과잉치 분류에 따른 치수유래줄기세포 계대 배양 시간의 연관성

신요섭 , 김종빈 , 김종수 대한소아치과학회지 2016.01 학술저널

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과잉치는 정상 치열에 부가적으로 존재하는 치아로, 단독 또는 복수로 발생되고 편측성 또는 양측성으로 존재한다. 전신질환이나 증후군과 연관될 수 있으며, 정상적으로 맹출 혹은 매복되거나, 치아 맹출, 치열의 발육에 영향을 줄 수 있다. 과잉치는 인접치아의 맹출 장애, 변위 및 낭종의 형성 등 부정적인 요소로 여겨지고 있으며, 조기에 발치 하는 것을 권장하고 있다.
최근 과잉치가 줄기세포의 또 다른 공급원이 될 수 있다는 연구 결과로 새롭게 각광받고 있다. 일반적으로 치아로부터 얻을 수 있는 줄기세포는 사랑니와 탈락시기의 유치가 주로 이용되었다. 사랑니는 계대 배양에 평균 소요되는 시간이 7 - 10일로 알려져 있으며 발치를 청소년기 이후로 비교적 늦은 나이 시행하는 경향이 있다. 그러나, 과잉치는 비교적 어린 나이에 발치하게 되므로 사랑니와는 다른 특성을 가지고 있으리라 여겨진다.
본 연구는 상악 매복 과잉치를 가지고 전신질환 및 의과 병력이 없는 만 5 - 9세 사이의 남녀 20명으로부터 서면동의를 얻고 상악 전치부에 매복된 과잉치를 발치하고 치수세포를 채취하였다. 채취 후 세포의 1차 배양 동안 오염된 3명(남자 2명, 여자 1명)을 제외하고 총 17명(남자 10명, 여자7명)을 대상으로 하였다 이번 연구에서 과잉치 치수조직으로부터 유래한 세포의 계대 배양에 소요된 평균 시간은 2.91 ± 0.29일이었다. 최초 치수조직으로부터 세포를 얻은 후 80% confluency를 얻는데 소요되는 시간이 4.53 ± 0.94일로 가장 많이 걸렸고, 이후 계대부터는 2.73 ± 0.32일이 소요되었다.
1계대를 제외한 2계대부터 10계대까지 소요된 시간은 2.73 ± 0.32일이었고 각 계대 배양에 소요된 시간 사이에는 남자의 비율은 58.82%, 여자의 비율은 41.18%이었다. 여자의 평균 소요시간은 2.81 ± 0.27일 이었으며, 남자는 2.98 ± 0.29이었다.
과잉치가 역위된 비율은 82.35%, 정위 비율은 17.65%였다. 평균 계대 소요 배양 시간은 역위가 2.94 ± 0.30일, 정위는 2.80 ± 0.20일이었다. 원뿔형(Conical type)은 76.47%였고, 그 외 형태는 23.53%였다. 원뿔형의 평균 소요시간은 2.92 ± 0.31이었고, 그 외 형태의 소요 시간은 2.88 ± 0.22이었다. 매복 방향과 형태에 따른 계대 배향 시간은 통계적으로 유의한 차이를 보이지 않았다.
3일 이내의 계대 배양 시간이 소요된 점을 고려할 때, 연구의 효율성과 빠른 배양시간 등은 과잉치 유래세포가 치아유래 줄기세포의 연구에 활용가능성이 충분하리라 판단되었다.
향 후 초기 계대와 후기 계대에서 얻어진 세포의 줄기세포로써의 능력을 평가하는 후속 연구들이 필요하며, 이를 통해 후기 계대세포의 활용이 세포의 공급원 확대에 기여할 수 있으리라 사료된다.

Supernumerary teeth are additional teeth to normal dentition with either single or multiple occurrence as well as either unilateral or bilateral occurrence. It may be associated with systemic diseases or syndromes, and may be in relation to eruption, impaction of teeth and development of dentition. Supernumerary teeth were believed to be a negative factor in relation to adjacent tooth eruption, displacement and development of cyst, naturally leading to early extraction. However, viewpoints on supernumerary teeth have dramatically changed after the recent research on the possibility of supernumerary teeth being an additional source of stem cells. Supernumerary teeth in general are extracted at relatively earlier stage and therefore are believed to have different characteristics from those of wisdom teeth.
For this research and upon written consent from 20 children of both genders between the ages of 5~9 with no systemic disease nor medical history, supernumerary teeth impacted in the maxillary anterior have been extracted and pulp cells have been collected from them. From the collected pulp cells, total of 17(10 males, 7 females) have been selected as subjects. From this research, the runtime of successive culture of the cell from pulp tissue was 2.91 ± 0.29 days. From the gathering of cells from the initial pulp tissue until gaining 80% confluency took 4.53± 0.94 which was the longest. The following successive cultures took 2.73 days. All passage from the 2nd to the 10th except for the 1st passage took 2.73 ±0.32 days and between each subculture’s runtime had male: female ratio of 58.82%: 41.18%. Average runtime for female was 2.81 ± 0.27 days whereas male had average runtime of 2.98 ± 0.29 days. Inversion ratio was 82.35% and normal location ratio was 17.65%. Average runtime for inversion was 2.94 ± 0.30 days and for normal location, 2.80 ± 0.20 days. Conical type was 76.47% of total and other forms was 23.53%. Average runtime was 2.92 ± 0.31 days and other forms took 2.88 ± 0.22 days. None of the above showed any statistically significant difference. Taking into consideration the less than 3 days’ time for the subculture, it could be concluded that the research efficiency and fast cultivation would be sufficiently effective. In the future, follow up research would be needed to evaluate the efficiency of the cells collected from the initial passage and the latter passage as stem cells and from these follow up researches, the utilization of the latter passage would contribute to the expansion of sources of supply of cells.

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