大黃膏의 메티실린 내성 황색 포도상구균에 대한 항균활성 :The antimicrobial activity of Daehwanggo against Methicillin-resistant Staphylococcus aureus

이순애

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자료유형: 학위논문

저자정보: 이순애 (원광대학교, 원광대학교 일반대학원)

지도교수: 권동열

발행연도: 2016

저작권: 원광대학교 논문은 저작권에 의해 보호받습니다.

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이 논문의 연구 히스토리 (2)

2017

대황고(大黃膏)의 메티실린 내성 황색 포도상구균에 대한 항균활성

이순애 , 공룡 , 강옥화 외 9명 대한본초학회지(본초분과학회지) 2017.01 학술저널

2016

大黃膏의 메티실린 내성 황색 포도상구균에 대한 항균활성

이순애 한약 2016.01 학위논문

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MRSA에 의한 감염 질병은 전 세계적으로 계속해서 큰 문제가 되고 있다. MRSA 특징은 항생제에 대한 저항력이 끝없이 유전자 변환을 한다는 것이다. 대황고는 동의보감에 수록된 처방의 하나로, 오래전부터 주로 외용제로 사용되어져 왔다. 이 연구의 목적은 대황고의 항생제 보조제로서의 역할을 확인하는 것이다. 대황고와 기존 항생제와의 시너지 효과를 관찰하고, 또한 MRSA가 어떤 기전에 의해 생장이 억제되는지 확인하는 것이다. 이 실험을 통해 얻은 결과는 DHG의 최소억제농도를 측정한 결과 500 ~ 2000 μg/mL 정도가 나타났고, checkerboard method를 통해서 시너지효과를 확인한 결과 DHG와 일반 항생제를 병용하였을 때에 부분적인 시너지 및 시너지 효과가 나타나는 것을 확인하였다. 또한 DHG가 항생제 옥사실린과 겐타마이신의 최소억제농도를 줄여주는 것을 확인할 수 있었다. MRSA에 대한 DHG의 억제 기전을 확인한 결과 베타락탐계 항생제와 관련된 유전자와 단백질의 내성 유전자 단백질의 발현을 억제하는 것을 확인할 수 있었다. 또한 세포막 실험을 통해 DHG가 MRSA의 세포막 투과도에 효과가 있다는 것을 확인할 수 있었다. 그리고 이 결과를 통해서 우리는 DHG가 MRSA 세포벽의 구조를 변화시켜 항생제의 활성을 증가시켜 MRSA를 억제한다는 것을 확인할 수 있었다. 이 결과로 DHG는 항생제 또는 항생제 보조제로서의 가능성이 있다는 것을 시사하는 바이다.

Ⅰ. 서론 1
Ⅱ. 재료 및 방법 5
2.1. 大黃膏의 제조 5
2.2. 시약 5
2.3. 균주 및 배양 6
2.4. 항균활성 측정 6
2.4.1. 디스크 확산법 (Disc diffusion method) 6
2.4.2. 최소억제농도 (Minimum inhibitory concentration, MIC) 7
2.4.3. 약물병용효과 (Fractional inhibitory concentration index, FICI) 7
2.4.4. 타임킬 분석법 (Time-kill curve assay) 8
2.5. 항균활성 기작 8
2.5.1 세포막 투과성 (cytoplasmic membrane permeability) 억제 8
2.5.2 RNA 분리 및 RT-PCR 8
2.5.3. Western blot 분석 10
2.6. 통계분석 11
Ⅲ. 결과 12
3.1. 디스크 확산법 (Disc diffusion method) 12
3.2. 최소억제농도 (Minimum inhibitory concentration, MIC) 16
3.3. 약물병용효과 (Fractional inhibitory concentration index, FICI) 18
3.3.1. DHG와 Oxacillin(OX)의 병용효과 18
3.3.2. DHG와 Gentamicin(GT)의 병용효과 20
3.4. Time-kill curve assay 22
3.4.1. DHG + OX에서 ATCC 33591의 생장곡선 22
3.4.2. DHG + GT에서 ATCC 33591과 CCARM 3102와 DPS-3의 생장곡선 24
3.5. DHG와 막 투과성 증진제와의 병용효과 30
3.6. RT-PCR 분석 32
3.7. Western blot 분석 35
Ⅳ. 고찰 37
Ⅴ. 결론 40

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