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논문 기본 정보
- 자료유형
- 학위논문
- 저자정보
- 지도교수
- 방인석
- 발행연도
- 2017
- 저작권
- 호서대학교 논문은 저작권에 의해 보호받습니다.
이용수3
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김(Porphyra yezoensis, Laver)의 MeOH 추출에 의한 유기용매별 분획물에서 항산화 활성이 높게 나타난 CHCl3 분획이 간암세포주의 세포증식 억제 효과 및 유전자 발현 양상을 분석하였다. 유기 용매별 분획의 항산화 활성은 시료의 농도가 증가할수록 DPPH에 대한 전자공여능도 증가하였으며, ED50은 CHCl3 분획에서 16.96 μg/ml로 가장 높게 나타났다. CHCl3 분획에 대한 폴리페놀 함량은 10.34 μg/mg으로 13.08 μg/mg의 물 분획 다음으로 높았다. 1,000 μg/ml의 CHCl3 분획이 24 시간 동안 처리된 간암세포주는 50% 세포증식이 억제되었으며, 48 시간 처리에서는 80%의 세포증식을 억제하였다. 50 μg/ml의 CHCl3 분획을 간암세포주에 6 및 24 시간 각각 처리한 유전자 발현 양상은 차이를 보이지 않았으나, 72 개 유전자의 발현 증가 및 34 개 유전자의 발현 감소를 확인하였다. 김의 효능과 연관지은 gene ontology 분석으로 항균작용에 대한 반응, 비타민 D 합성 및 영양물질에 대한 반응에 관련된 유의 유전자들를 탐색하여 IL-6R, CYP1A1, CYP24A1 유전자를 선정하였다. 또한 pathway 분석으로 ARNT와 SMC3 유전자가 상기 유전자들의 upsteam regulator일 가능성을 예측하였다. 한편 50 및 100 μg/ml의 CHCl3 분획이 처리된 간암세포주에서의 IL-6R와 CYP1A1 단백질의 실제 발현은 IL-6R의 경우 무처리구와 비교하여 1.5 배와 2 배의 증가, CYP1A1의 경우 1.7 배와 1.3 배의 발현 감소를 각각 Western blot으로 확인하였다.
목차
목 차Ⅰ. 서 론 10Ⅱ. 재료 및 방법 131. 재료 및 시약 132. 실험 방법 14가. 김의 추출 14나. 폴리페놀 함량 측정 16다. DPPH 자유라디칼 소거능 측정 16라. 세포배양 17마. 세포증식 억제 측정 17바. DNA microarray 18a. Total RNA 추출 18b. 유전체 분석 18c. Microarray 분석 19사. Western blot 20Ⅲ. 결 과 211. 김 추출 분획의 수율 212. 폴리페놀 함량 233. 항산화 활성 254. 김 추출 분획에 의한 HepG2 세포증식 억제 285. 유전체 분석 30가. Total RNA 분리 30나. 칩 분석 및 Scatter plot 32다. MA plot 35라. 발현패턴 확인 37마. Gene Ontology 분석 39바. 후보 유전자군 41사. Pathway 분석 466. Western blot 49Ⅳ. 고 찰 51Ⅴ. 참 고 문 헌 55Ⅵ. Abstract 62
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