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논문 기본 정보

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학위논문
저자정보

최민혁, Choi, Minhyuek (인하대학교, 인하대학교 대학원)

지도교수
김철희
발행연도
2018
저작권
인하대학교 논문은 저작권에 의해 보호받습니다.

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이 논문의 연구 히스토리 (2)

초록· 키워드

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본 연구에서는 자극에 감응하여 약물을 방출할 수 있게 도와주는 게이트키퍼
와 특정 암세포의 수용기에 대한 목표지향 리간드의 역할이 동시에 가능한 단
백질 (CKPSSPPEECW)을 표면에 도입해 다공성 실리카 나노전달체
(Si-cA6-PEG)를 제조하였다. A6 단백질 (KPSSPPEE)는 폐암, 난소암, 유방암
에서 많이 발현되는 CD44 수용기와 강한 결합친화성을 갖고 있어 특정 암세포
를 목표지향할 수 있다고 알려져 있다. A6 단백질 양 말단에 도입한 두 개의
Cysteine은 분자 내 다이설파이드결합을 형성하여 고리형구조를 만들어 입체장
애가 커지게 되어 게이트키퍼로써의 기능을 갖게 한다. C-말단에 입체장애가
큰 Tryptophan을 도입하여 펩타이드의 게이트키핑 능력을 향상시켰다. 또한, 분
산안정성과 생체적합성을 위해 PEG를 도입하였다. 아무런 자극이 없을 때에는
봉입된 약물이 게이트키퍼로 인해 방출되지 않음을 확인하였다. disulfide bond
는 GSH에 환원되어 두 개의 싸이올 그룹이 되고 구조가 변화되어 게이트키퍼
로써의 기능을 잃고 약물은 방출되었다. 다양한 암세포에서 발현된다고 알려진
GSH(glutathione)을 넣어주었을 경우 분자내의 다이설파이드 본드가 두 개의
thiol로 환원되면서 봉입시켜 놓은 약물이 방출 되는 것을 확인 하였다. 또한,
in vitro
실험을 통해 다공성 실리카 나노전달체를 넣어주었을 경우 CD44 수용
기가 존재하는 MDA-MB-231-cell이 CD44수용기가 존재하지 않는 SK-BR3
cell 보다 더 빨리 세포사멸을 일으킨 것을 확인하였다.

목차

Table of Contents
Table of Contents .............................................................................................I
List of Figures .................................................................................................Ⅲ
Abstract (in Korean) .......................................................................................Ⅳ
Abstract .............................................................................................................Ⅴ
Chapter 1. Introduction ..................................................................................1
Chapter 2. Experimental section ....................................................................6
2.1. Materials ................................................................................................6
2.1.1. Materials ..........................................................................................6
2.2. Synthesis method .................................................................................6
2.2.1. Synthesis of Si-NH2 .......................................................................6
2.2.2. Synthesis of Si-alkyne ...................................................................6
2.2.3. Peptide synthesis ...........................................................................7
2.2.4. Intramolecular disulfide bond formation ........................................7
2.2.5. Synthesis of silica nanoparticles with peptide gatekeepers ............7
2.2.6. PEGylation of MSNs ......................................................................8
2.3. Experimental method and equipment .................................................8
2.3.1 Transmission electron microscopy .................................................8
2.3.2. Fluorescence measurements .........................................................8
2.3.3. Fourier transform infrared spectroscopy .......................................9
2.3.4. Zeta-potential analysis ...................................................................9
- II
2.3.5 Cell lines and culture condition .....................................................9
2.3.6. Antibodies .......................................................................................9
2.3.7. Confocal laser scanning microscopy to assess cellular uptake
of Si-cA6-PEG and intracellular release ...........................................9
2.3.8. Analysis of localization of DOX released from Si-cA6-PEG by
confocal laser scanning microscopy ..................................................9
2.3.9. TUNEL assay ...............................................................................10
2.3.10. Immunoblot analysis ..................................................................10
2.3.11. Quantification of clonogenic cell death ....................................10
2.3.12 Statistical Analysis .......................................................................11
Chapter 3. Results and discussion ..............................................................12
Chapter 4. Conclusion ...................................................................................28
References ......................................................................................................29

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