비만은 인슐린 저항성의 증가 등 대사 이상을 일으켜, 당뇨병, 심혈관 질환, 뇌혈관 질환 등을 유발하는데, 비만이 대사성 질환으로 발전하는 과정에 염증반응이 큰 역할을 한다. 비만으로 인한 대사성 염증은 이소성 지방축적을 가속화하고, 지방조직에 대식세포를 침윤시킨다. 침윤된 대식세포는 TNF-α, IL-6 등 염증성 사이토카인을 분비하며, 지방세포가 세포내로 당을 유입하는 능력을 감소시켜 인슐린 저항성을 유발한다. 따라서 지방조직 내 대식세포에 의한 염증반응을 억제하는 것이 비만으로 인한 대사성 질환의 예방과 치료에 중요하다. 厚朴(Magnolia Bark)은 性味는 溫, 苦辛하고 芳香이 있어, 行氣, 導滯, 燥濕하는 효능을 가지므로, 痰濕, 食積, 寒凝氣滯로 인한 병증에 널리 쓰인다. 따라서 비만과 비만으로 유발된 대사증후군의 치료에 적합하다. 본 연구에서는 렙틴 유전자가 결핍되어 비만과 고혈당 등의 대사적 특징을 갖는 ob/ob mouse에 厚朴 추출물을 6주간 경구 투여 한 후, 체중, 혈당, 인슐린 저항성, 지방조직내의 백혈구와 수와 비율, 백혈구 중 M1형 세포의 수와 비율, 염증성 물질의 변화 등을 관찰하였다. 그 결과, 厚朴투여군에서 인슐린 저항성이 유의하게 개선되었고, 지방조직 내 백혈구의 수가 감소하였으며, 지방조직 내 백혈구 중 대식세포의 수와 비율이 감소하였고, 지방조직 내 대식세포 중 M1형 대식세포의 수와 비율이 감소하였고, 염증성 물질 중 TNF-α의 발현양이 감소하였다. 이러한 결과를 바탕으로 厚朴의 투여가 ob/ob mouse에서 비만으로 인해 유발되는 대사성 염증과 인슐린 저항성에 대해 개선 효과가 있음을 확인하였다.
Objective : This study was undertaken to investigate how Magnolia Bark extract affects ob/ob mouse in terms of metabolic inflammation and insulin resistance. Methods : Leptin-deficient ob/ob mice were divided into 2 groups(n=5) of normal saline treat(=control) and Magnolia Bark treat. Wild type mice were lean group(n=5). After 5 weeks, we measured FBS and OGTT in each group. After 6 weeks, we measured body weight, epididymal fat pad weight, liver weight, serum glucose, serum insulin, and gene expression of Tumor Necrosis Factor-α, Interferon-γ and Interleukin-6. We characterized phenotype of adipose tissue macrophages(ATMs) and analysed fractions of phenotype in each group by flow cytometry. Results : In Magnolia group, fasting blood sugar, oral glucose tolerance levels and insulin resistance(HOMA-IR) were significantly decreased. Population and proportion of ATMs among leukocyte in adipose tissue were significantly decreased in Magnolia group. Population and proportion of M1 type ATMs among ATMs were significantly decreased in Magnolia group. Gene expression of Tumor Necrosis Factor-α was significantly decreased in Magnolia group. Conclusions : These results support an effect of Magnolia Bark on metabolic disease such as insulin resistance and metabolic inflammation in Leptin-deficient ob/ob mouse. Key words : Magnolia Bark, ob/ob mouse, metabolic inflammation, insulin resistance, ATMs
目 次Ⅰ. 緖 論 1Ⅱ. 實驗方法 31. 검체의 제조 32. 실험동물의 준비 33. 실험군 배정 및 연구 계획 44. 체중 측정 55. 경구당부하 검사 56. 인슐린 저항성 측정 57. 내장지방의 무게 측정 68. 지방조직에서 기질세포(Stromal Vascular Cell, SVC)의 분리 69. 지방조직 내 면역세포에 대한 Fluorescence Activated Cell Sorting 분석 710. 지방조직에서 RNA의 분리 711. 염증성 물질의 유전자 발현 분석 812. 통계 분석 9Ⅲ. 結 果 101. 체중의 변화 102. 내장지방의 변화 113. 당대사의 변화 131) 혈당의 변화 132) 인슐린 저항성의 변화 164. 지방조직 내 면역세포의 변화 181) Fluorescence Activated Cell Sorting 분석 18(1) CD45 18(2) F4/80, CD11b 18(3) CD11c 182) 면역세포의 분포 19(1) 백혈구 중 대식세포의 비율 19(2) 대식세포 중 M1형 대식세포의 비율 195. 염증성 물질에 대한 유전자 발현 정도의 변화 251) Tumor Necrosis Factor-α(TNF-α) 252) Interferon-γ(IFN-γ) 253) Interleukin-6(IL-6) 25Ⅳ. 考 察 28Ⅴ. 結 論 35參考文獻 36ABSTRACT 41