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논문 기본 정보
- 자료유형
- 학위논문
- 저자정보
- 지도교수
- 윤도영
- 발행연도
- 2018
- 저작권
- 건국대학교 논문은 저작권에 의해 보호받습니다.
이용수4
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본 연구는 약물들의 암세포 조절효과를 확인하기 위해 수행되었다. 첫 번째 물질인 STK899704는 새로운 합성 제제로 자궁경부암, 폐암과 같은 많은 암세포에서 항암효과를 가진다고 보고된 제제이며, 두번째 물질 Kanakugiol은 Lindera erythrocarpa Makino (Lauraceae)의 줄기 껍질에서 추출한 물질이다. 본 연구에서는 STK899704가 대장암세포의 이동성을 억제하는지를 wound healing assay를 통하여 확인하였다. STK899704는 대장암 세포의 이동성을 억제하였고, 세포의 이동에 관련된 인자들인 focal adhesion kinase (FAK)와 paxillin의 mRNA 발현 역시 감소시켰다. 관련된 인자들 중 FAK의 하위 신호전달에 속해 있는 mitogen-activated protein kinase (MEK), extracellular signal regulated kinase (ERK)의 발현을 western blot으로 확인해 본 결과, STK899704로 인해 감소되는 것을 확인하였다. 또한, STK899704는 대장암줄기세포의 줄기세포능과 관련된 유전자의 발현이나, sphere의 형성을 억제하였다. 이러한 결과들로 STK899704는 FAK-MEK-ERK 신호전달을 억제함으로써 대장암세포의 이동능력을 감소시키며, 대장암줄기세포의 줄기세포능 역시 억제하는 효능을 가진 약물임을 확인하였다.
다음으로는, kanakugiol이 가진 대장암세포 이동 억제 효과를 확인하였다. kanakugiol이 HT29 대장암세포의 이동에 미치는 효과를 transwell invasion assay와 wound healing assay를 통해 조사하였다. Kanakugiol의 처리는 HT29 대장암세포의 침윤과 이동성을 줄였으며, 세포 외 기질을 분해하여 세포가 침윤할 수 있게 도와주는 효소인 MMP-9의 mRNA발현, 효소 활성도 역시 감소시켰다. 또한, kanakugiol의 처리는 Epithelial mesenchymal transition (EMT) 관련 분자들의 유전자 발현 수준을 감소시켰으며, 관련된 분자 중 의 하나인 E-cadherin의 단백질 발현 수준도 감소시켰다.
따라서, 본 연구는 STK899704와 kanakugiol이 대장암의 대체치료 약물로 사용 될 수 있음을 제시한다.
다음으로는, kanakugiol이 가진 대장암세포 이동 억제 효과를 확인하였다. kanakugiol이 HT29 대장암세포의 이동에 미치는 효과를 transwell invasion assay와 wound healing assay를 통해 조사하였다. Kanakugiol의 처리는 HT29 대장암세포의 침윤과 이동성을 줄였으며, 세포 외 기질을 분해하여 세포가 침윤할 수 있게 도와주는 효소인 MMP-9의 mRNA발현, 효소 활성도 역시 감소시켰다. 또한, kanakugiol의 처리는 Epithelial mesenchymal transition (EMT) 관련 분자들의 유전자 발현 수준을 감소시켰으며, 관련된 분자 중 의 하나인 E-cadherin의 단백질 발현 수준도 감소시켰다.
따라서, 본 연구는 STK899704와 kanakugiol이 대장암의 대체치료 약물로 사용 될 수 있음을 제시한다.
목차
Chapter 1. Inhibitory effect of STK899704 on stemness of cancer stem cells and migration of colon cancer cell 11.1. Abstract 11.2. Introduction 21.3. Materials and Methods 31.3.1. Cell culture and spheroid body formation 31.3.2. Reagents 31.3.3. Cell viability assays 31.3.4. Gelatin zymography 41.3.5. Generation of focal adhesion kinase (FAK)-overexpressing cells 41.3.6. Wound healing assay 51.3.7. Isolation of CD133+ cells 51.3.8. Reverse transcription polymerase chain reaction analysis 51.3.9. Western blot analysis 61.3.10. Immunofluorescence 61.3.11. Analysis of Gene Network 71.3.12. Statistical analyses 71.4. Results 81.4.1. STK899704 was cytotoxic to colon cancer cells but not to normal colon cells 81.4.2. STK899704 inhibited migration in HT29 adherent cells 101.4.3. STK899704 inhibited expression of FAK, MEK, and ERK 121.4.4. STK899704 suppressed the properties of HT29 CSCs 141.5. Discussion 20Chapter 2. The modulating effect of kanakugiol on migration and invasion in HT29 colon cancer cells 212.1. Abstract 212.2. Introduction 222.3. Material and Methods 232.3.1. Cell culture and reagents 232.3.2. Cell viability assays 232.3.3. Wound healing assay 232.3.4. Matrigel invasion assay 232.3.5. Reverse transcription polymerase chain reaction analysis 242.3.6. Statistical analysis 242.4. Results 252.4.1. Kanakugiol inhibits migration and invasion in HT29 colon cancer cells 252.4.2. Kanakugiol suppresses mRNA expression and activity of MMP-2/-9 inHT29 colon cancer cells 282.4.3. Kanakugiol inhibits metastasis-related genes expression in HT29 coloncancer cells. 302.5. Discussion 32References 33Abstract (in Korean) 37
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