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논문 기본 정보

자료유형
학위논문
저자정보

현혜숙 (호서대학교, 호서대학교 대학원)

지도교수
조경연
발행연도
2018
저작권
호서대학교 논문은 저작권에 의해 보호받습니다.

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이 논문의 연구 히스토리 (3)

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유전체 서열 분석에 의하면 점액세균 Mycococcus stipitatus DSM 14675는 폴리케타이드(PK), 비리보솜 펩티드(NRP), 또는 폴리케타이드와 비리보솜 펩티드의 혼성체(PK-NRP)의 생합성을 위한 26개 이차대사 유전자군을 가지고 있는 것으로 분석되었다. 이들 중 7개 유전자군은 dawenol, DKxanthene, melithiazol, myxochelin, myxoprincomide, phenalamide, rhizopodin 생합성 효소를 암호화하는 것으로 추정되었으나 나머지 19개 유전자군들은 어떤 종류의 물질을 생산하는지 알 수 없었다.
26개 유전자군들이 생산하는 이차대사산물을 확인하기 위해 플라스미드 삽입에 의해 각 유전자군을 불활성시킨 변이주들을 제조하고, 배양추출물을 분석하였다. MYSTI_04318-04329 유전자들은 phenalamide 생합성 유전자군이며, MYSTI_04965-04973은 melithiazol 생합성 유전자군이고, MYSTI_06004-06018은 DKxanthene 생합성 유전자군인 것으로 확인되었다. LC-MS 분석에 의하면 M. stipitatus DSM 14675가 생산하는 melithiazol와 phenalamide는 기존에 알려진 물질들이지만, DKxanthene은 기존에 분리되었던 물질과는 다른 새로운 유도체인 것으로 분석되었다. DKxanthene은 M. stipitatus DSM 14675에서 포자형성에 필수적이지 않았으며, 항진균 활성을 가진 것으로 나타났다.
DKxanthene은 영양생장 단계에서는 발현되지 않고 자실체 형성 시에만 생산되는 반면, melithiazol, phenalamide는 영양생장 시와 자실체 형성 시 모두에서 생산되었다. 진균인 Aspergillus niger는 야생형 점액세균의 집락을 침범하지 못하였다. 하지만 영양생장 중인 melithiazol 또는 phenalamide 유전자 불활성 변이주의 집락을 침범하였으며, 자실체를 형성 중인 DKxanthene 유전자 불활성 변이주의 집락도 침범하였다. 따라서 melithiazol과 phenalamide는 M. stipitatus DSM 14675의 진균으로부터 영양생장 단계의 점액세균 집락을 보호하며 DKxanthene은 자실체 형성 중인 점액세균들을 보호하는 것으로 사료되었다. DKxanthene은 선충인 Caenorhabditis elegans로부터 M. stipitatus DSM 14675를 보호하는 역할을 하는 것으로 나타났다. 또한 M. stipitatus DSM 14675의 선충 포식에 있어서 필수적이었다. Melithiazol과 phenalamide는 항선충 활성을 보이지 않았다.
DKxanthene, melithiazol, phenalamide의 생산에는 전사조절인자 HsfA가 필수적이어서 hsfA 유전자가 불활성화된 변이주에서는 세 물질의 생산이 사라지거나 감소되었다. hsfA 유전자 불활성 변이주는 자실체 형성능력과 및 포자형성능력이 결손 되었는데, 야생형 균주를 섞어준 경우 포자형성 능력이 회복되었다. 따라서 HsfA가 이차대사산물 생산과 자실체 형성을 연결하는 인자인 것으로 사료되었다. Melithiazol과 phenalamide의 생산은 또 다른 전사조절인자를 암호화하는 MYSTI_05387 유전자를 필요로 하였지만 DKxanthene의 생산에는 필요하지 않은 것으로 나타났다.
M. stipitatus DSM 14675는 미지의 물질 분비를 통해 근거리에 있는 그람양성 세균을 사멸시키지만 대장균의 사멸을 위해서는 직접적인 접촉이 필요한 것으로 나타났다. 또한 다른 미생물과의 접촉에 의해 새로운 물질 생산이 유도되기도 하였다. 본 연구에서는 이러한 연구를 통해 얻어진 여러 결과들을 기반으로 점액세균으로부터 신규 물질을 탐색하고자 할 때 적용할 수 있는 방법들을 제시하였다.

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