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논문 기본 정보

자료유형
학위논문
저자정보

이승우 (경북대학교, 경북대학교 대학원)

지도교수
박진규.
발행연도
2018
저작권
경북대학교 논문은 저작권에 의해 보호받습니다.

이용수8

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이 논문의 연구 히스토리 (3)

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비 알코올성 지방간증 (Non-alcoholic fatty liver disease, NAFLD)은 비만 및 대사장애에 의해 발생하는 질환으로, 세계에서 가장 흔한 만성 간 질환중의 하나로 알려져 있다. 하지만, 비 알코올성 지방간증의 정확한 발생기전은 아직까지 충분히 연구되지 않은 상태이다. Senescence Marker Protein 30 (SMP30)은 과거, 노화가 진행됨에 따라 androgen 비의존적으로 발현이 감소되는 양상이 관찰된 바 있으며 이밖에도 세포내에서, vitamin C 생합성 및 calcium 항상성 조절을 한다고 알려져 있다. Vitamin C는 대표적인 항산화 물질중의 하나로써 최근, NAFLD 환자에서 vitamin E 함께 투여 시 간세포 보호효과가 있다는 것이 밝혀진 바 있다. 현재까지 vitamin C 단독투여가 NAFLD 및 지질대사에 어떠한 영향을 끼치는지에 대해선 밝혀진 게 없는 상태이다. 본 연구에서는, NAFLD의 기전에 SMP30 및 vitamin C의 역할을 규명하기 위해 SMP30 유전자 치환 마우스를 이용하여 실험을 진행하였다. 실험은 12-15 주령 수컷 WT 마우스와 SMP30 유전자 치환 마우스를 각각 유지 사료, 고지방 사료, vitamin C 투여 유지 사료, vitamin C 투여 고지방 사료, 4 그룹씩 나눠 총 8그룹으로11주 동안 진행되었다. Vitamin C는 음수에 1.5g/L 용량으로 희석하여 투여되었다. 실험결과 SMP30 유전자 치환 마우스는 WT 마우스에 비해 육안적, 현미경적으로 유의하게 완화된 지방간증 소견을 보였다. 또한SMP30 유전자 치환 마우스는 WT 마우스에 비해 유의하게 낮은 간내 지질축적 소견을 보였다. 혈청 분석 결과 SMP30유전자 치환 마우스는 WT 마우스에 비해 확연히 낮은 혈중 vitamin C 및 지질 농도차를 보여주었다. 또한, 고지방사료를 공급받은SMP30 유전자 치환 마우스 WT 마우스에 비해 유의미하게 낮은 혈청 내 ALT 수치를 보여주었다. 이밖에도, SMP30 유전자 치환 마우스는 WT 마우스에 비해 더 높은 지방 대사 및 에너지 흡수 매개 mRNA와 증가된 p-AMPK 활성을 보였다. 또한 세포실험 결과, vitamin C 투여 시 세포내 지질축적이 증가하는 것이 확인되었다. 결론적으로 SMP30결핍은 동물에서 AMPK활성화를 통하여 지방대사를 촉진시키는 것으로 나타났으며, vitamin C 투여 시 in vitro 실험에서 세포내 지방구가 다소 증가하는 것이 관찰되었다. 본 연구 결과는 이전까지 보고된 바 없는 새로운 연구 결과로써, 향후 SMP30 및 vitamin C가 지방대사에 끼치는 새로운 기전을 연구하는 대에 중요한 자료로 사용될 수 있을 뿐 아니라, 향후 지방간증 치료에 새로운 기전을 제시할 수도 있을 것으로 사료된다.

목차

CONTENTS
INTRODUCTION 1
MATERIALS & METHODS 5
1. Animals and experimental design 5
2. Histopathology 6
3. Immunohistochemistry 6
4. Immunoblot analysis 7
5. Serum biochemistry for the measurement of ALT and Vitamin C level 8
6. Liver triglyceride measurement 9
7. Quantitative RT-PCR 9
8. Cell culture and in vitro experiments 11
9. Statistical analysis 12
RESULTS 13
1. There was no difference in the values of diet ingestion / body weight between WT mice and SMP30 KO mice 13
2. SMP30 depletion exhibited significantly lower liver weight compared to that of high-fat diet fed WT mice 15
3. Hepatocyte sizes of SMP30 KO mice were significantly smaller compared with those of WT mice. 18
4 SMP30 KO mice showed significantly lower values of histopathological liver steatosis grade compared with WT mice. 21
5. SMP30 depletion exhibited much less triglyceride accumulation in the liver compared to high-fat diet fed WT mice 25
6. There was no significant change in SMP30 expression level among all WT groups. 28
7. SMP30 KO mice revealed significantly reduced serum vitamin C and ALT levels compared with WT mice 30
8. Serum triglyceride level was lower in SMP30 KO mice compared with WT mice 32
9. Enhanced levels of β-oxidation and cellular fatty acid uptake related mRNA are associated with depletion of SMP30 in the liver of high-fat diet fed mice 34
10. SMP30 KO mice also exhibited significantly higher levels of lipogenic mRNA compared with those of WT mice 38
11. Activation of AMPK (AMP activated protein kinase) was dramatically enhanced by SMP30 depletion in the liver of high-fat diet fed mice 40
12. Vitamin C supplements significantly increased intracellular triglyceride level in oleic acid treated AML 12 hepatocytes 42
DISCUSSION 44
ABSTRACT 53
REFERENCES 55
국문초록 60

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