목차

Ⅰ. 서론
1. 장내미생물 1
1-1. 프로바이오틱스 2
1-2. 프리바이오틱스 3
2. GABA(Gamma Amino Butyric Acid) 4
3. 미강 6
4. Essential oil 7
5. 공초점 현미경 8
6. Electrostatic spray 9
7. 연구목적 10
Ⅱ. 재료 및 방법
1. 실험 재료 11
1-1. 사용균주 및 배지 11
1-2. 곡류 및 Essential oil 11
1-3. 시약 및 기기 13
2. 실험 방법 14
2-1. 유산균 분리 및 균주보관 14
2-2. 유산균 동정 14
2-2-1. API 50 CHL kit analysis 14
2-2-2. 16s rDNA analysis 15
2-3. 유산균의 생장 및 특성 16
2-3-1. 균주의 생장곡선 및 pH변화 16
2-3-1. 균주의 내산성 실험 16
2-3-2. 균주의 내답즙산 실험 16
2-4. GABA 정량법 17
2-4-1. 시료의 전처리 17
2-4-2. GABA 정량방법 17
2-4-3. 온도, pH, MSG 첨가에 따른 GABA생성량 19
2-5. 곡물소재의 유산균 증식 효과 검증 20
2-5-1. 생장곡선을 통한 혼합곡물추출물의 생육 증진 효과 검증 20
2-6. CLSM을 이용한 곡물과 유산균의 부착능 검사 21
2-6-1. 곡물과 Lactobacillus brevis CFM21의 부착능 검사 21
2-7. Eseential oil의 항균활성 22
2-7-1. Paper agar diffusion 22
2-7-2. Minimum Inhibitory Concentration 22
2-8. 미강 추출물 배지 제작 23
2-8-1. 탄소원, 질소원, MSG 첨가에 따른 GABA생성량 23
2-8-2. 배지 최적화에 따른 GABA생성량 23
2-9. 혼합곡물 팽화식품 24
2-9-1. 혼합곡물 팽화식품의 제조 24
2-9-2. CLSM을 이용한 electrostatic spray 도포도 분석 24
2-9-3. Electrostatic spray 처리에 따른 GABA함량 24
2-9-4. Essential oil 혼합에 따른 GABA 함량 25
3. 통계 처리 26
Ⅲ. 결과 및 고찰
1. 유산균의 분리 동정 27
1-1. 유산균의 분리 및 API 50 CHL kit 27
1-2. 16s rRNA gene Sequencing 29
2. Lactobacillus brevis CFM21의 생장 31
2-1. Lactobacillus brevis CFM21의 생장곡선 및 pH 변화 31
2-2. Lacotbacillus brevis CM21의 내산성 및 답즙산 내성 34
3. Lactobacillus brevis CFM21의 GABA생성량 36
3-1. 상업용 유산균과 분리 유산균의 GABA생성량 36
3-2. pH, MSG 첨가에 따른 Lactobacillus brevis CFM21의GABA 생성량 37
4. 곡물소재의 유산균에 대한 증식효과 41
4-1. 생장곡선을 통한 곡물소재의 유산균에 대한 증식효과 40
5. CLSM을 통한 곡물과 Lactobacillus brevis CFM21의 부착능 검사 43
6. Eseential Oil의 항균활성 45
6-1. Paper agar diffusion assay를 통한 항균활성 측정 45
6-2. Minimum Inhibitory Concetration test 48
7. 미강 추출물 배지의 최적화 50
7-1. 탄소원, 질소원, 무기염류 첨가에 따른 GABA 생성량 50
7-2. 최적화된 배지의 MSG 첨가에 따른 GABA 생성량 51
8. 곡물소재 팽화식품의 Electrostatic spray 처리 54
8-1. CLSM을 통한 electrostatic spray의 분포도 분석 54
8-2. Essential oil 첨가에 따른 GABA함량 56
Ⅳ. 결론 59
Ⅴ. 참고문헌 61