감맥대조탕이 DNCB로 유발된 생쥐의 아토피피부염에 미치는 영향 :

류지연

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자료유형: 학위논문

저자정보: 류지연 (동신대학교, 東新大學校)

지도교수: 丁敏暎

발행연도: 2020

저작권: 동신대학교 논문은 저작권에 의해 보호받습니다.

이용수3

이 논문의 연구 히스토리 (2)

2020

감맥대조탕이 DNCB로 유발된 생쥐의 아토피피부염에 미치는 영향

류지연 2020.01 학위논문

감맥대조탕이 DNCB로 유발된 생쥐의 아토피피부염에 미치는 영향

류지연 , 감은영 , 강은정 외 4명 한방안이비인후피부과학회지 2020.01 학술저널

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아토피피부염은 재발이 빈번한 만성 염증성 피부 질환이다. 본 연구의 목적은 아토피피부염에서 감맥대조탕 (GMD)의 효능을 알아보고자 시행되었다. 본 연구는 DNCB 용액을 Nc/Nga 마우스에 적용하여 아토피피부염을 유발 한 다음 정상 그룹, 증류수를 사용한 음성 대조군, Dexamethasione을 사용한 양성 대조군, GMD 200mg/kg 또는 400mg/kg. 대조군에 시료를 4 주 동안 매일 1 회 200μl를 경구 투여 한 후, 육안적 피부 상태, 면역 글로불린 E, 히스타민, 사이토 카인, 면역 세포, 조직 바이오 마커등을 측정 및 관찰하였다. 육안적 피부 평가 결과, GMD 투여군이 음성 대조군에 비해 증상이 개선되었음을 확인 하였다. IgE를 측정 한 결과, GMD 투여군은 음성 대조군과 비교하여 유의하게 감소 하였다. 히스타민을 측정 한 결과, 200mg/kg의 GMD를 제외한 GMD 그룹은 음성 대조군에 비해 유의하게 감소 하였다. 사이토 카인을 측정 한 결과, GMD 200mg/kg은 음성 대조군과 비교하여 IL-1β, IL-6 및 TNF-α를 유의하게 감소시켰다. GMD400mg/kg은 IL-1β, IL-4, IL-5, IL-6, IL-10, TNF-α를 유의하게 감소 시켰고 IL-2, IFN-γ를 유의하게 증가시켰다. 면역 세포를 확인한 결과, 모든 실험군은 호염구에선 유의미한 차이가 없었으며, GMD군은 음성 대조군과 비교하여 단핵구와 호산구를 유의하게 감소시켰으며, GMD 400mg/kg 군은 백혈구와 호중구를 유의하게 감소시켰다. 유전자 발현 수준을 측정 한 결과, 모든 GMD 군은 음성 대조군과 비교하여 TGF-β1을 유의하게 증가 시켰고, 필라그린, VEGF 및 EGF는 GMD400mg /kg 군에서 유의하게 증가 하였다. 표피, 진피 두께 및 호산구 침윤은 음성 대조군과 비교하여 모든 GMD 군에서 감소하였다. 본 연구 결과를 토대로 GMD는 T세포 (Th1/Th2)의 면역 반응 불균형을 줄이고 피부 조직 손상과 염증 반응을 감소시켜 아토피피부염에 효과적이라는 사실이 입증되었다.

Objectives : Atopic dermatitis is a chronic inflammatory skin disease with frequent relapses. This study was to investigate the efficacy of Gammakdaejo-tang(GMD) in atopic dermatitis.

Methods : The study was divided into five comparion groups.
2,4-dinitrochlorobenzene(DNCB) solution was applied to Nc / Nga mice to induce atopic dermatitis, followed by normal group, Negative control group with distilled water, Positive control group with Dexamethasione and GMD 200mg/kg or 400mg/kg. The control group was orally administered 200 μl once daily for 4 weeks. Visual skin condition, Immunoglobulin E, Histamine, Cytokine, immune cells, tissue Biomarkers were observed.

Results : As a result of the dermatitis score evaluation, it was confirmed that the GMD-administered group improved symptoms compared to the negative control group. As a result of measuring IgE, the GMD-administered group significantly decreased compared to the negative control group. As a result of measuring Histamine, GMD group except 200mg/kg of GMD significantly decreased compared to negative control group. As a result of measuring cytokine, GMD 200mg/kg significantly reduced IL-1β, IL-6 and TNF-α compared to the negative control. 400mg/kg significantly reduced IL-1β, IL-4, IL-5, IL-6, IL-10, TNF-α and significantly increased IL-2, IFN-γ. As a result of confirming the immune cells, all experimental groups showed no difference in basophil, GMD group significantly reduced monocyte and eosinophil compared to negative control group, and GMD 400mg/kg group significantly reduced white blood cell and neutrophil. And significantly increased lymphocytes.
As a result of measuring the gene expression level, all GMD group significantly increased TGF-β1 compared with the negative control group, and filaggrin, VEGF and EGF were significantly increased in GMD400mg/kg group. Epidermis, dermis thickness, and eosinophil infiltration were found to be decreased in all GMD groups compared with the negative control group.

conclusion : GMD is effective in atopic dermatitis by reducing imbalance of immune response of T cells (Th1 / Th2) and reducing skin tissue damage and inflammatory response.

keywords : Atopic dermatitis(AD), 2,4-dinitrochlorobenzene(DNCB), Gammakdaejo-tang(GMD), Nc/Nga mice

目次
List of Tables Ⅳ
List of Figures Ⅴ
국문초록 Ⅶ
Ⅰ. 서 론 1
Ⅱ. 재료 및 방법 3
1. 재료 3
1) 시료 3
2) 실험동물 및 사육 3
3) 시약 3
4) 기기 4
2. 방법 4
1) 시료 추출 4
2) HPLC 검사 4
3) 중금속 검사 5
4) 아토피 피부염 유발 및 시료처리 5
5) 혈청 분리 및 등 조직 채취 5
6) 육안적 평가 6
7) 혈액 내 바이오마커 측정 6
(1) Immunoglobulin E (IgE) 6
(2) Histamine 7
(3) Cytokine 7
8) 면역세포 분석 7
9) 조직 내 바이오마커 측정 8
10) 조직학적 검사 8
3. 통계 처리 9
Ⅲ. 실험 결과 10
1. HPLC 분석 10
2. 중금속 함량 11
3. 육안적 평가 12
4. 혈액 내 바이오마커 13
1) Immunoglobulin E (IgE) 13
2) Histamine 14
3) Cytokine 15
(1) IL-1β 15
(2) IL-2 16
(3) IL-4 17
(4) IL-5 18
(5) IL-6 19
(6) IL-10 20
(7) TNF-α 21
(8) IFN-γ 22
5. 면역세포 23
1) white blood cell 23
2) Monocyte 24
3) Neutrophil 25
4) Eosinophil 26
5) Basophil 27
6) Lymphocyte 28
6. 조직 내 바이오마커 29
1) Filaggrin 29
2) VEGF 30
3) TGF-β1 31
4) EGF 32
7. 조직학적 검사 33
1) 피부 두께 33
2) 호산구 침윤 34
Ⅳ. 고 찰 35
Ⅴ. 결 론 39
참고문헌 41
ABSTRACT 45

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