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논문 기본 정보

자료유형
학위논문
저자정보

장덕영 (목원대학교, 목원대학교 대학원)

지도교수
양재찬
발행연도
2020
저작권
목원대학교 논문은 저작권에 의해 보호받습니다.

이용수23

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이 논문의 연구 히스토리 (2)

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붉나무는 옻나무과에 속하는 낙엽소교목으로 염증, 천식 및 건선에 효과가 있다고 알려져 있다. 본 연구에서는 붉나무 열매 Ethanol extract(ET), Ethyl acetate fraction(EA) 및 Butanol fraction(BT)의 천연화장품 소재로의 활용 가능성을 평가하기 위하여 독성평가. 항산화 활성, 항노화 활성, 항균 활성, UVB로 유도된 ROS 저해 효과를 측정하고 화장품 제형에 적용하여 안정성을 확인하였다. 독성평가는 각질형성세포인 HaCaT 세포와 Zebrafish embryo를 이용하여 세포생존율과 embryo의 응고율과 부화율로 평가하였다. 항산화 활성은 DPPH 라디칼 소거 활성, SOD 유사 활성, FRAP 활성, ABTS+ 라디칼 소거 활성으로 평가하였고, 0.1-1.0mg/mL의 농도에서 시행하였다. 항노화 활성은 Elastase 및 Collagenase 저해 활성을 통하여 평가하였고, 0.1-1.0mg/mL의 농도에서 시행하였다. UVB로 유도된 ROS 저해 효과는 HaCaT 세포와 Zebrafish embryo를 이용하여 UVB로 유도된 ROS가 DCFH-DA와 결합하여 발현되는 형광의 세기를 측정하여 평가하였다. 항균활성은 Staphylococcus aureus(S. aureus), Staphylococcus epidermidis(S. epidermidis), Escherichia coli(E. coli), Pseudomonas aeruginosa(P. aeruginosa), Candida Albicans(Candida. A)에 대하여 Paper disc법으로 생육저해환을 확인하였고 최소저해농도(MIC)를 평가하였으며 Challenge test를 통하여 화장품 제형에서 항균 활성을 평가하였다. 화장품 제형에서의 안정성은 pH, 점도, Turbiscan® LAB을 이용하여 입자 거동의 양상을 관찰하였다. ET, EA, BT는 5μg/mL이하의 농도에서 독성은 관찰되지 않았다. 항산화 활성은 ABTS+ 라디칼 소거 활성, DPPH 라디칼 소거 활성, SOD 유사 활성, FRAP 활성 순으로 측정되었으며, 농도 의존적으로 효과가 있었다. 항노화 활성은 Elastase 저해 활성보다 Collagenase 저해 활성이 뛰어났으며 농도 의존적으로 효과가 있었다. Paper disc법으로 생육저해환을 측정한 결과 ET, EA, BT 모든 시료에서 S. aureus, S. epidermidis, E. coli, P. aeruginosa 균주에서 생육저해환이 관찰되었고 BT에서는 Candida. A 균주에 대한 생육저해환이 추가로 관찰되었다. MIC 측정 결과 EA 시료가 S. aureus, S. epidermidis, E. coli, P. aeruginosa 균주에 대하여 가장 낮은 최소저해농도를 보였다. Challenge test를 통하여 제형 내에서 항균 활성을 측정한 결과 ET, EA, BT 모든 시료에서 S. aureus, S. epidermidis, E. coli, P. aeruginosa 균주에서 효과가 있었고 BT는 Candida. A 균주에서도 효과가 있었다. UVB로 유도된 ROS 저해 효과는 EA > ET > BT 순이였으며 농도 의존적으로 DCFH-DA 형광의 세기가 감소하였다. 화장품 제형에서의 안정성 시험의 결과 pH, 점도, 입자의 거동을 측정한 결과 control과 유사한 양상을 보여 안정하였다. 따라서 본 연구의 결과는 붉나무 열매 추출물이 천연 기능성 소재로 활용 가능할 것으로 사료 된다.

목차

Ⅰ. 서 론 1
Ⅱ. 재료 및 방법 7
1. 실험 재료 7
1) 붉나무 열매 7
2) 시약 및 기기 8
2. 실험 방법 10
1) 붉나무 열매 추출물 제조 10
2) 붉나무 열매 추출물의 독성평가 12
(1) in vitro 수준에서 독성평가 11
① 세포 배양 11
② 세포 생존율 측정 11
(2) in vivo 수준에서 독성평가 12
① 부화율 및 응고율 측정 12
3) in vitro 수준에서 붉나무 열매 추출물의 효능 평가 13
(1) 총 폴리페놀 및 플라보노이드 함량 분석 13
① 총 폴리페놀 함량분석 13
② 총 플라보노이드 함량분석 14
(2) 붉나무 열매 추출물의 항산화 효능 평가 15
① DPPH 전자공여능 측정 15
② SOD anion radical 소거능 측정 16
③ 환원력 측정 17
④ ABTS radical cation decolorization 18
(3) 붉나무 열매 추출물의 항노화 효능 평가 19
① Elastase inhibition에 의한 항노화 측정 19
② Collagenase inhibition에 의한 항노화 측정 20
(4) UVB로 유도된 ROS 저해 효과(HaCaT cell) 21
(5) 붉나무 열매 추출물의 항균 효능 평가 22
① 균주 배양 22
② 생육저해환 측정 23
③ Minimum Inhibition Concentration(MIC) 24
④ Challenge test 25
4) in vivo 수준에서 붉나무 열매 추출물의 효능 평가 27
(1) UVB로 유도된 ROS 저해 효과(Zebrafish) 27
5) 제형 내에서 붉나무 열매 추출물의 효능 및 안정성 평가 28
(1) 붉나무 열매 추출물의 항산화제 보호 효과 28
(2) 붉나무 열매 추출물을 첨가한 에멀전 제조 30
(3) 붉나무 열매 추출물을 첨가한 에멀전의 안정성 평가 32
① pH 측정 32
② 점도 측정 32
③ Turbiscan® LAB 평가 32
Ⅲ. 결과 및 고찰 33
1) 붉나무 열매 추출물의 독성평가 33
(1) HaCaT cell의 생존율 측정 결과 33
(2) Zebrafish embryo에서의 발생 독성평가 결과 34
2) in vitro 수준에서 붉나무 열매 추출물의 효능 평가 36
(1) 총 폴리페놀 및 플라보노이드 함량분석 결과 36
(2) 붉나무 열매 추출물의 항산화 효능 평가 37
① DPPH radical scavenging activity 37
② SOD-like activity 38
③ FRAP activity 39
④ ABTS+ radical scavenging activity 40
(3) 붉나무 열매 추출물의 항노화 효능 평가 41
① Elastase inhibition activity 결과 41
② Collagenase inhibition activity 결과 42
(4) HaCaT cell에서 UVB로 유도한 ROS의 저해 효과 43
(5) 붉나무 열매 추출물의 항균 효능 평가 46
① 생육저해환 측정 결과 46
② 붉나무 열매 추출물의 최소저해농도 49
③ 가용화 제형에서 방부 효능 평가 50
3) in vivo 수준에서 붉나무 열매 추출물의 효능 평가 56
(1) Zebrafish에서 UVB로 유도된 ROS의 저해 효과 56
4) 제형 내에서 붉나무 열매 추출물의 효능 및 안정성 평가 58
(1) 붉나무 열매 추출물의 항산화제 보호 효과 58
(2) 붉나무 열매 추출물을 첨가한 에멀전의 안정성 평가 59
① pH 측정 결과 59
② 점도 측정 결과 60
③ Backscattering 측정 결과 62
Ⅳ. 결론 64
참 고 문 헌 66
Abstract 73

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