Pycnogenol? supplementation attenuates memory deficits and protects hippocampal CA1 pyramidal neurons via antioxidative role in a gerbil model of transient forebrain ischemia :일과성 전뇌 허혈 저빌 모델에서 Pycnogenol? 처치 후 항산화 작용을 통한 해마의 CA1 피라미드 뉴런의 보호 및 기억 결손의 약화

Bora Kim

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자료유형: 학위논문

저자정보: Bora Kim (강원대학교, 강원대학교 대학원)

지도교수: 원무호

발행연도: 2021

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이용수24

이 논문의 연구 히스토리 (4)

2021

Pycnogenol? supplementation attenuates memory deficits and protects hippocampal CA1 pyramidal neurons via antioxidative role in a gerbil model of transient forebrain ischemia

Bo , a Kim 의학과 2021.01 학위논문

CD200 change is involved in neuronal death in gerbil hippocampal CA1 filed following transient forebrain ischemia and postischemic treatment with risperidone displays neuroprotection without CD200 change

Bo , a Kim , Hyejin Sim 외 9명 한국실험동물학회 학술발표대회 논문집 2021.01 학술대회자료

2020

High fat diet accelerates and exacerbates microgliosis and neuronal damage/death in the somatosensory cortex after transient forebrain ischemia in gerbils

Bo , a Kim , Hyejin Sim 외 9명 한국실험동물학회 학술발표대회 논문집 2020.07 학술대회자료

Pre-treatment with laminarin protects hippocampal CA1 pyramidal neurons and attenuates reactive gliosis following transient forebrain ischemia in gerbils

Bo , a Kim , Tae-Kyeong Lee 외 10명 한국실험동물학회 학술발표대회 논문집 2020.02 학술대회자료

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Pycnogenol® (PYC)은 프랑스 해안에 서식하는 소나무의 껍질에서 추출한 것으로 탁월한 항산화 효능을 가지며 건강보조식품으로 사용되고 있다. 그러나 일과성 허혈 에 따른 허혈성 손상에 대한 PYC의 신경세포 보호에 대한 연구 결과는 미비한 실정이다. 본 연구에서는 저빌에서 전뇌허혈(transient forebrain ischemia, TFI)을 유발한 뒤 4-5일 후, 해마의 CA1 영역에 위치하는 pyramidal cells에 유의미한 손상을 일으키는 5분간의 일과성 전뇌허혈로부터 PYC의 신경세포 보호 및 보호 기전에 대한 연구를 수행하였다. TFI유발 전, 실험동물에게 하루 1회씩 7일 동안 30, 40 및 50 mg/kg의 PYC을 투여하였다. 50 mg/kg의 PYC을 투여했을 경우에 허혈 손상으로 인지 및 기억능력 장애를 완화하였으며, 허혈성 손상으로부터 유의미한 CA1 영역의 pyramidal cells을 보호를 관찰하였다. PYC의 전 투여는 TFI유도 전과 후에 해마 CA1영역에서 초과산화물 불균등화 효소(superoxide dismutases, SODs) 및 카탈레이스(catalase, CAT)와 같은 항산화 효소들에 대한 면역반응성을 유의미하게 향상시켰다. 또한, PYC의 전 투여는 해마 CA1영역의 pyramidal cells에서 허혈로 인한 과산화물음이온, RNA 산화, 지질 산화 최종산물의 생성을 유의미하게 감소시킨 것으로 확인되었다. 더 나아가, SODs와 CAT 효소 활성의 강력한 억제제인 sodium azide의 투여로 인하여 일과성 전뇌허혈에 대한 PYC의 신경 보호 효과를 발휘하지 못하는 것을 관찰하였다. 본 연구 결과를 토대로, 강력한 항산화 작용을 통해 PYC의 허혈성 손상으로 인한 신경세포 보호 효능 및 기전을 확인하였으며, PYC는 허혈성 뇌졸중 예방용 보조제로서 활용될 수 있음을 시사한다.

#Antioxidation #Antioxidant enzymes #Free radicals #Ischemia-reperfusion injury #Neuroprotection #Oxidative stress

1. INTRODUCTION 1
2. MATERIALS AND METHODS 3
2.1. Experimental animals 3
2.2. PYC preparation and characteristics 4
2.3. Experimental groups and PYC supplementation 6
2.4. TFI induction 7
2.5. Tests of learning and memory 8
2.5.1. Passive avoidance test (PAT) 8
2.5.2. 8-Arm radial maze test 9
2.6. Preparation of tissue sections 10
2.7. Histochemistry with cresyl violet (CV) 11
2.8. Histofluorescence with Fluoro-Jade B (F-J B) 12
2.9. Immunohistochemical stainings 13
2.10. Dihydroethidium (DHE) histofluorescence 15
2.11. Treatment of sodium azide 16
2.12. Statistical analysis 17
3. RESULTS 18
3.1. Attenuation of learning and memory deficits 18
3.1.1. PAT 18
3.1.2. 8-arm radial maze test 19
3.2. Protection of CA1 pyramidal cells 22
3.2.1. CV+ cells 22
3.2.2. NeuN+ cells 25
3.2.3. F-J B positive (F-J B+) neurons 26
3.3. Attenuated oxidative stress 29
3.3.1. DHE fluorescence 30
3.3.2.8. OHG and 4HNE immunoreactivities 31
3.4. Increased antioxidant enzyme immunoreactivities 34
3.4.1. SODs immunoreactivity 34
3.4.2. CAT immunoreactivity 36
3.5. SA effect on oxidative stress 39
3.6. Disappearance of neuroprotection by SA 42
3.6.1. NeuN+ cells 42
3.6.2. F-J B+ cells 43
4. DISCUSSION 46
5. REFERENCES 51

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