Expression of the Recombinant Single-Chain Anti-B Cell Lymphoma Antibody

Tae Hyun Choi; Chang Woon Choi; Ok Doo Awh; Sang Moo Lim

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자료유형: 학술저널

저자정보: Tae Hyun Choi Chang Woon Choi Ok Doo Awh Sang Moo Lim

저널정보: 대한의생명과학회 대한의생명과학회지 대한의생명과학회지 제9권 제3호

발행연도: 2003.9

수록면: 111 - 121 (11page)

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Recombinant single chain Fv (scFv) antibodies offer many advantages over mouse monoclonal antibodies such as faster clearance from blood, improved tumor localization, reduced human anti-mouse antibody (HAMA) response, and the availability to manipulate the scFv through genetic approaches. The recombinant phage display was constructed using lym-1 hybridoma cells as a source of genetic starting material. mRNA was isolated from the corresponding antibodies hybridoma cells. VH and VL cDNA were amplified with RT-PCR and linked with ScFv by linker DNA to form ScFv DNA, which then were inserted into phagemid pCANTAB5E. The phage of postive clones selected with tube containing raji lymphoma cell and infected by competent E. coli HB2151 to express soluble scFv. The scFv lym-1 was secreted into the cytosol and culture supernatant and shown to be of expected size (approximately 32 kDa) by western blot. An active scFv lym-1 could be produced in E. coli with soluble form and high yield from hybridoma cell line, using phage display system. Immunoreactivity indicated that scFv lym1 showed a potential biding affinity against the raji lymphoma cell as its parental antibody (intact lym-1 Ab).

#Single chain Fv #Phage dispolay #Lym-1 antibody

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Tae Hyun Choi

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Chang Woon Choi

소속기관 대한의생명과학회

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Ok Doo Awh

소속기관 대한의생명과학회

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Sang Moo Lim

소속기관 대한의생명과학회

주요연구분야 의약학 > 의학 일반

논문수 1 이용수 36

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