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대한안면통증구강내과학회 Journal of Oral Medicine and Pain 대한구강내과학회지 제34권 제3호
발행연도
2009.9
수록면
261 - 276 (16page)

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Sreptomyces라는 세균에서 추출한 lactacystin은 선택적인 proteasome 억제제로서 많은 연구에서 사용되어져 왔다. Proteasome 억제제는 최근의 많은 연구를 통해서 암세포증식의 억제에 대한 효과가 증명되었으며, 특히 다른 항암제와 병용처리 시, 상호작용에 의한 상승효과가 있다고 알려져 있다. 현재 proteasome 억제제는 새로운 강력한 항암제로서 분류되어 있다. 본 연구는 사람혀편평세포암종세포(SCC25 cells)에서 lactacystin의 세포독성과 성장억제 효과, 그리고 세포자멸사의 유도에 대한 분자생물학적 기전을 밝히기 위해 실험을 시행하였다.
SCC25 세포, 사람정상각화세포 (HaCaT cells) 그리고 사람치은섬유모세포(HGF-1 cells)의 생존율 측정은 MTT법을 시행하였고, SCC25 세포의 성장억제를 확인하기 위해서는 clonogenic assay를 사용하였다. lactcystin이 SCC25 세포에서 세포자멸사가 유도되는지를 확인하기 위해서 hoechst 염색법, hemacolor 염색법 그리고 TUNEL법을 시행하였다. 그리고 SCC25 세포에 lactacystin을 적용한 후, Western blot 분석, 세포면역화학염색, 공초점레이저주사현미경 검경, FACScan flow cytometry, 사립체막 전위변화, proteasome 활성도 측정 등을 시행하였다.
Lactacystin으로 처리된 SCC25 세포는 시간 및 용량 의존적인 세포생존율의 감소, 용량의존적인 세포성장억제 그리고 세포자멸사에 의한 세포죽음을 보였다. 흥미롭게도 lactacytin은 정상세포인 HaCat 세포와 HGF-1 세포에서는 세포독성을 전혀 보이지 않았다. 그리고 lactacystin이 적용된 SCC25세포에서 핵 응축, DNA의 조각남, 사립체막전위와 proteasome 활성도의 감소, DNA 양의 감소, cytochrome c의 사립체에서의 세포질로의 유리, AIF와 DFF40 (CAD)의 핵으로의 이동, Bax의 증가, caspase-7, caspase-3, PARP, lamin A/C 그리고 DFF45 (ICAD)의 활성화 혹은 파괴와 같은 아주 다양한 세포자멸사 증거를 보였다. Flow cytometry 분석에서는 CDK 억제제인 p21<SUP>WAF1/CIP1</SUP>와 p27<SUP>KIP1</SUP>의 발현 증가와 관계있는 것으로 추정되어 지는 G1 세포주기 정지를 보였다.
이러한 결과는 lactacytin이 SCC25 세포에서 G1 세포주기정지와 proteasome, 사립체 및 caspase 경로의 연속반응을 통한 세포자멸사를 유도함을 명확하게 증명하고 있다. 이와 같은 세포주기 정지와 세포자멸사 유도능은 lactacytin이 사람혀편평상 피세포암종의 새로운 치료전략으로서의 가능성을 제공한다고 생각한다.
#Apoptosis #Proteasome inhibitor #Lactacystin #Human tongue squamous carcinoma #세포자멸사 #사람혀편평상피암종

목차

Ⅰ. INTRODUCTION
Ⅱ. MATERIALS AND METHODS
Ⅲ. RESULTS
Ⅳ. DISCUSSION
Ⅴ. CONCLUSION
REFERENCES
국문초록

참고문헌 (48)

참고문헌 신청
1. [학술지(정기간행물)] - Carson DA / 1993 / Apoptosis and disease / Lancet 341 : 1251 ~ 1254 google schola 2. [학술지(정기간행물)] - Ohta K / 1999 / Apoptosis of eosinophils and lymphocytes in allergic inflammation / J Allergy Clin Immunol 104 : 14 ~ 21 google schola 3. [학술지(정기간행물)] - Williams GT / 1991 / Programmed cell death: apoptosis and oncogenesis / Cell 65 : 1097 ~ 1098 google schola 4. [학술지(정기간행물)] - Thornberry NA / 1997 / Control of apoptosis by proteases / Adv In Pharmacol 41 : 155 ~ 177 google schola 5. [학술지(정기간행물)] - Green DR and Reed JC / 1998 / Mitochondria and apoptosis / Science 281 : 1309 ~ 1312 google schola

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