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기존에 생선 검출을 위한 ELISA 개발은 여러 편 보고된 바 있으나, 고등어만을 특이적으로 검출하는 방법에 관한 보고는 거의 없었다. 본 연구에서는 고등어 parvalbumin에 대한 토끼 항체를 이용하여 가공식품 중 고등어의 검출을 위한 ELISA를 개발하였다. 암모늄침전법과 Sephadex G-50 column chromatography를 이용하여 열에 안정한 12 kDa의 고등어 parvalbumin을 분리, 정제하였다. 여기에서 얻어진 parvalbumin을 토끼에게 면역하여 생산한 항 parvalbumin 항체 및 특이항체-HRP 복합물을 이용하여 샌드위치 ELISA(sELISA)의 조건을 확립하였다. 이때 parvalbumin의 검출한계는 3 ng/mL이고, 고등어(생살)의 검출범위는 5-5,000 μg/mL이었다. 이어서. 광어, 우럭, 오징어, 꽃게, 꽁치, 대구, 새우,
연어, 바다가재, 고등어에 대한 교차반응을 조사한 결과 고등어에 대한 반응성은 월등히 높았으나 다른 수산식품에서는 반응성이 거의 없거나 매우 낮게 나타나 고등어에 대한 특이성이 매우 높은 항체임을 알 수 있었다. 또한 분석시 시료의 열 안정성은 100℃까지 양호하였으며 크림스프, 이유식, 소시지, 소스에 대한 spike test(0.01-0.3%)에서 분석회수율은 각각 104, 101, 54, 0%로 나타났다. sELISA에 의하여 16점의 시판시료 중 고등어의 함유 유무를 조사한 결과, 정성적으로 표시와 일치하는 것은 75%이었다. 그러므로 본 연구에서 개발한 sELISA는 일부 한계가 있기는 하지만, 가공식품 중 고등어를 정성적으로 검출하는데는 효과적으로 활용할 수 있을 것이다.
연어, 바다가재, 고등어에 대한 교차반응을 조사한 결과 고등어에 대한 반응성은 월등히 높았으나 다른 수산식품에서는 반응성이 거의 없거나 매우 낮게 나타나 고등어에 대한 특이성이 매우 높은 항체임을 알 수 있었다. 또한 분석시 시료의 열 안정성은 100℃까지 양호하였으며 크림스프, 이유식, 소시지, 소스에 대한 spike test(0.01-0.3%)에서 분석회수율은 각각 104, 101, 54, 0%로 나타났다. sELISA에 의하여 16점의 시판시료 중 고등어의 함유 유무를 조사한 결과, 정성적으로 표시와 일치하는 것은 75%이었다. 그러므로 본 연구에서 개발한 sELISA는 일부 한계가 있기는 하지만, 가공식품 중 고등어를 정성적으로 검출하는데는 효과적으로 활용할 수 있을 것이다.
목차
Abstract
서론
재료 및 방법
결과 및 고찰
요약
감사의 글
문헌
참고문헌 (28)
참고문헌 신청
1. [학술지(정기간행물)] - Lee HK / 1995 / A single or combined effects of IL-4 and other various cytokines on IgE production of human tonsillar mononuclear cells / Korean J. Immunol 17 : 193 ~ 201
2. [학술지(정기간행물)] - Okunuki H / 2000 / Induction of active systemic anaphylaxis by oral sensitization with ovalbumin in mast-cell-deficient mice / Immunol. Lett 74 : 233 ~ 237
3. [학술지(정기간행물)] - Broide DH / 2001 / Molecular and cellular mechanisms of allergic disease / J. Allergy Clin. Immun 108 : S65 ~ S71
4. [학술지(정기간행물)] - Eggesbø M / 1999 / Prevalence of parentally perceived adverse reactions to food in young children / Pediatr. Allergy Immu 10 : 122 ~ 132
5. [학술지(정기간행물)] - Ostblom E / 2009 / Phenotypes of food hypersensitivity and development of allergic diseases during the first 8 years of life / Clin. Exp. Allergy 38 : 1325 ~ 1332
2. [학술지(정기간행물)] - Okunuki H / 2000 / Induction of active systemic anaphylaxis by oral sensitization with ovalbumin in mast-cell-deficient mice / Immunol. Lett 74 : 233 ~ 237
3. [학술지(정기간행물)] - Broide DH / 2001 / Molecular and cellular mechanisms of allergic disease / J. Allergy Clin. Immun 108 : S65 ~ S71
4. [학술지(정기간행물)] - Eggesbø M / 1999 / Prevalence of parentally perceived adverse reactions to food in young children / Pediatr. Allergy Immu 10 : 122 ~ 132
5. [학술지(정기간행물)] - Ostblom E / 2009 / Phenotypes of food hypersensitivity and development of allergic diseases during the first 8 years of life / Clin. Exp. Allergy 38 : 1325 ~ 1332
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