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조류 독감바이러스(avian influenza virus, AIV)는 사람에게서 발생하는 인플루엔자 대유행에 중요한 역할을 한다. 특히 최근 AIV H9N2형에 의한 가금류 감염이 빈번히 나타나고 있어 인체 감염이 상당히 우려되는 실정이다. 본 연구에서는 최종적으로 AIV의 HA와 NA 단백질에 특이적으로 반응하는 항혈청을 생산하고자 하였다. 먼저 감염된 닭에서 분리된 AIV H9N2 한국분리주 A/Ck/Kr/MS96/96의 게놈 RNA로부터 RT-PCR 방법으로 HA와 NA단백질 N-말단부위에 해당하는 염기서열을 증폭하였다. 이렇게 증폭된 DNA 단편은 E. coli 발현벡터 pGEX4T-1에 삽입한 후, BL21 세포에서 각각의 GST fusion protein (GST-HA1n와 GST-NAn) 형태로 발현하였다. GSTHA1n와 GST-NAn은 모두 glutathione sepharose column을 사용하여 분리 및 정제하였으며, 정제된 단백질을 항원으로 사용하여 토끼 항혈청을 생산하였다. 생산된 항혈청의 항원특이성은 AIV H9N2 한국분리주 A/Ck/Kr/MS96/96로 감염된 MDCK 세포의 cell extract를 사용하여 immunoblotting을 수행함으로써 확인하였다. 본 실험결과 AIV H9N2의 HA와 NA 단백질 N-말단부위에 해당하는 재조합 GST fusion protein과, 이들 각각의 단백질에 특이적으로 반응하는 항혈청은 앞으로 AIV 감염의 진단 뿐만 아니라, AIV에 대한 기초연구에 중요한 재료로 사용될 것으로 기대한다.
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결과
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참고문헌
ABSTRACT
참고문헌 (31)
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1. [학술지(정기간행물)] - Alexander, D.J / 2000 / A review of avian influenza in different bird species / Vet. Microbiol 74 : 3 ~ 13
2. [학술지(정기간행물)] - Alexander, D.J / 2002 / Report on avian influenza in the Eastern hemisphere during 1997-2002 / Avian Dis 47 : 792 ~ 797
3. [학술지(정기간행물)] - Banks, J. / 2000 / Phylogenetic analysis of influenza A viruses of H9 haemagglutinin subtype / Avian Pathol 29 : 353 ~ 359
4. [단행본] - Centers for Disease Control and Prevention. 2005. Key facts about influenza and the influenza vaccine / 2005 / Key facts about influenza and the influenza vaccine / Centers for Disease Control and Prevention
5. [학술지(정기간행물)] - Dolin, R / 2005 / Influenza-interpandemic as well as pandemic disease / N. Engl. J. Med 353 : 2535 ~ 2537
2. [학술지(정기간행물)] - Alexander, D.J / 2002 / Report on avian influenza in the Eastern hemisphere during 1997-2002 / Avian Dis 47 : 792 ~ 797
3. [학술지(정기간행물)] - Banks, J. / 2000 / Phylogenetic analysis of influenza A viruses of H9 haemagglutinin subtype / Avian Pathol 29 : 353 ~ 359
4. [단행본] - Centers for Disease Control and Prevention. 2005. Key facts about influenza and the influenza vaccine / 2005 / Key facts about influenza and the influenza vaccine / Centers for Disease Control and Prevention
5. [학술지(정기간행물)] - Dolin, R / 2005 / Influenza-interpandemic as well as pandemic disease / N. Engl. J. Med 353 : 2535 ~ 2537
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