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저자정보
함승희 (창원대학교) 최낙식 (창원대학교) 문자영 (창원대학교) 백선화 (창원대학교) 이송민 (창원대학교) 강대욱 (창원대학교)
저널정보
한국생명과학회 생명과학회지 생명과학회지 제27권 제2호
발행연도
2017.2
수록면
202 - 210 (9page)

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토하젓에서 분리한 박테리오신 생산 균주 중 상대적으로 넓은 항균스펙트럼을 나타내는 1균주를 선발하였고 16S rRNA 유전자 염기서열 분석 결과 B. subtilis E9-1와 거의 일치하는 것으로 동정되었다. B. subtilis E9-1가 생산하는 박테리오신의 물리화학적 특성을 조사하였고, 박테리오신을 정제하였다. 이 박테리오신은 B. cereus KCCM 11204, M. luteus IAM 1056, L. monocytogenes KCCM 40307, E. faecium KCCM 12118 및 S. aureus subsp. aureus KCCM 40050 등에 대해서 항균활성을 나타내었다. pH 2.0~8.0 범위에서는 안정하였으나 8.0 이상에서는 항균활성이 감소하였다. Isopropanol, ethanol 및 methanol 등의 유기용매에서 100%까지, acetone과 acetonitrile에서는 80%까지 항균활성을 유지하였다. 내열성의 경우 40~100℃에서 60분까지는 안정하게 항균활성을 보였다. 박테리오신 농도를 증가시키면서 B. cereus, L. monocytogenes, E. faecium 및 S. aureus subsp. aureus 등 시험균 4주의 감수성을 조사한 결과 농도 의존적으로 시험균의 생육이 감소하였고 이중 L. monocytogenes 의 감수성이 가장 높게 나타났다. 박테리오신의 작용양상을 알아본 결과 B. cereus와 L. monocytogenes 배양액에 박테리오신 용액을 첨가한 후 흡광도와 CFU값이 감소하여 bactericidal임을 확인하였다. 식품에 적용 가능성을 알아보기 위해 실험한 결과 3일째부터 박테리오신을 처리하지 않은 대조구에 비해 실험구에서 생균수(CFU/ml)가 감소하였다. 아세톤을 이용한 배양상등액의 농축, superdex peptide HR 10/300 column 이용한 겔여과크로마토그래피, 역상 HPLC로써 박테리오신을 정제하였다. 역상 HPLC를 통해서 정제한 박테리오신의 분자량을 tricine SDS- PAGE로 분석한 결과 약 4 kDa이었고 질량분석법으로 측정한 정확한 분자량은 3347.6 Da로 나타났다.
#Bacillus subtilis #bacteriocin #molecular weight #physicochemical properties #purification

목차

서론
재료 및 방법
결과 및 고찰
References
초록

참고문헌 (25)

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Altschul, S. F., Gish, W., Miller, W., Myers, E. W. and Lipman, D. J. 1990. Basic local alignment search tool. J. Mol. Biol. 215, 403-410. Anastasiadou, S., Papagianni, M., Filiousis, G., Ambrosiadis, I. and Koidis, P. 2008. Pediocin SA-1, an antimicrobial peptide from Pediococcus acidilactici NRRL B5627: production conditions, purification and characterization. Bioresour. Technol. 99, 5384-5390. Bierbaum, G., Brotz, H., Koller, K. P. and Sagl, H. G. 1995. Cloning, sequencing and production of the lantibiotic mersacidin. FEMS Microbiol. Lett. 127, 121-126. Doopedia. Bacteriocin. http://www.doopedia.co.kr/ Dubois, J. Y. F., Kouwen, T.R.H.M., Schurich, A. K. C., Reis, C. R., Ensing, H. T., Trip, E. N., Zweers, J. C. and van Dijl, J. M. 2009. Immunity to the bacteriocin sublancin 168 is determined by the sunⅠ(YolF) protein of Bacillus subtilis. Antimicrob. Agents Chemother. 53, 651-661.

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