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논문 기본 정보

자료유형
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저자정보
저널정보
대한진단검사의학회 Annals of Laboratory Medicine Annals of Laboratory Medicine 제25권 제1호
발행연도
2005.1
수록면
66 - 70 (5page)

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배경 : 면역 중합효소연쇄반응법은 우수한 민감도와 특이도를보이는 획기적인 검사법으로 알려져 있으나, 아직 표준화된 검사방법이 제시되지 못하고 있다. 이에 면역 중합효소연쇄반응법의 검사과정을 각 단계별로 분석하여, 표준화된 검사방법을 완성하여 임상검사실에서 용이하게 사용할 수 있는 면역 중합효소연쇄반응법을 개발하고자 하였다.방법 : 면역 중합효소연쇄반응을 기존에 발표된 방법을 조합하여 시행하였으나 위양성이 나타났다. 이에 그 원인을 구명하고자각 시약별로 비특이 결합을 확인하였으며, 올리고핵산 더듬자 및검출용 항체의 희석 완충액을 선정하였다. Angiogenin 항원을 이용하여 완성된 면역 중합효소연쇄반응법의 민감도를 효소면역법과비교하여 관찰하였다.결과 : Streptavidin은 면역중합효소연쇄반응법에 의한 위양성의 주된 원인으로 밝혀져, neutravidin으로 교체하여 사용하였다.올리고핵산 더듬자의 희석완충액으로 CAS 및 Casein Block이,검출용 항체의 희석완충액으로는 10% Casein-T 용액이 각 위양성을 제거할 수 있었다. 완성된 면역 중합효소연쇄반응법의 민감도는 5 fg까지 측정할 수 있었으며, 효소면역법으로 5 pg까지측정되었다. 결론 : 새롭게 제시된 면역 중합효소연쇄반응법은 위양성이 발생하지 않았고, 매우 우수한 민감도를 나타내었다. 향후 효소면역 검사법으로 측정이 어려운 각종 미량항원의 검출에 획기적인 방법으로 활용될 수 있다.
#Immuno-PCR #Non specific binding #Neutravidin #Casein block #Detection limit

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/ 1992 / Immuno-PCR:Very sensitive antigendetection by means of specific antibody-DNA conjugates 258 : 120 ~ 2 google schola / 1993 / Immuno-PCR with a commer-cially available avidin system 30 : 698 ~ 9 google schola / 1993 / Universal immuno-PCR for ultra-sen-sitive target protein detection 25 : 6038 ~ 9 google schola / 1995 / Developmentof a two-site immuno-PCR assay for hepatitis B surface antigen 52 : 273 ~ 86 google schola / 1995 / Double determinant immuno-polymerase chain reaction:a sensitive method for detecting circulat-ing antigens in human sera 86 : 885 ~ 9 google schola

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