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한국미생물생명공학회 한국미생물·생명공학회지 한국미생물·생명공학회지 제32권 제4호
발행연도
2004.1
수록면
322 - 327 (6page)

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구성적 promoter인 PJH promoter 하류에 연결된 Bacillus sp. 유래의 endoxylanase를 B. subtilis에서 과발현 하였다. 발현된 plasmid, pJHKJ4는 자체 promoter(PB)와 Bacillus의 강력한 promoter(PJH)가 tandem으로 위치하여 transcription 되었다. B. subtilis DB431에 형질전환된 균주를 glucose가 함유된 LB 배지에서 배양 후 총활성 및 분비효율은 140 U/ml으로 나타났다. 배양상등액은 ultrafiltration(MW cut-off 10 kDa and 30 kDa)과 염석법으로 농축하였다. 효소의 농축에서 ultrafiltration이 70% ammonium sulfate precipitation보다 효과적이었다. 50oC에서 농축된 효소액의 안정화는 NaCl, glycerol, sorbitol, and CaCl2 등의 다양한 안정제를 농도별로 첨가하여 안정제의 효과를 검토한 결과, 가장 효과적인 안정제는 NaCl과 CaCl2이었다.

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