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논문 기본 정보

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학술저널
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저널정보
한국미생물생명공학회 Journal of Microbiology and Biotechnology Journal of Microbiology and Biotechnology 제16권 제9호
발행연도
2006.1
수록면
1,453 - 1,458 (6page)

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PKR-like endoplasmic reticulum (ER) kinase (PERK)is a type I transmembrane ER-resident protein containing acytoplasmic catalytic domain with a Ser/Thr kinase activity,which is most closely related to the eukaryotic translationinitiation factor-2α (eIF2α) kinase PKR involved in the antiviraldefense pathway by interferon. We cloned and expressed theEscherichiacoli. Like PERK activation in cells under ER stress, wild-typecPERK underwent autophosphorylation when overexpressedin E. coli, whereas the cPERK(K621M)with a methioninesubstitution for the lysine at amino acid 621 lost theautophosphorylation activity. The activated form cPERKwhich was purified to near homogeneity, formed an oligomerand was able to trans-phosphorylate specifically its celularsubstrate eIF2α. Two-dimensional phosphoamino acids analysisrevealed that phosphorylation of cPERK occurs at the Ser andThr residues. The functionaly active recombinant cPERK,and its inactive mutant should be useful for the analysis ofbiochemical functions of PERK and for the determination oftheir three-dimensional structures.

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