글루코스와 피부르산염의 농도가 조절된 DMEM과 Vero 세포를 이용한 무혈청 적응용 배양액의 개발에 관한 연구

김주환; 서영석; 송해범; 양정보; 이경은; 이기환

추천

검색

자료유형: 학술저널

저자정보: 김주환 서영석 송해범 양정보 이경은 이기환

저널정보: 대한산부인과학회 Obstetrics & Gynecology Science Obstetrics & Gynecology Science 제53권 제2호

발행연도: 2010.1

수록면: 143 - 151 (9page)

이용수

📌

연구주제

📖

연구배경

🔬

연구방법

🏆

연구결과

초록· 키워드

오류제보하기

목적: 본 연구는 글루코스와 피부르산염이 조절된 DMEM을 이용해 Vero 세포를 배양한 후 무혈청 적응용 배양액 (Serum-free Vero cell conditioned medium, SF-VCM)을 얻어 생쥐의 착상 전 생쥐 배아의 체외발달에 미치는 효과를 보기 위해 수행되었다. 연구 방법: 총 846개의 2-세포기 배아를 4~5주령의 ICR 계통 생쥐로부터 얻었다. 글루타민만 함유되어 있는 DMEM (DMEM-G)과 글루타민, 글루코스 및 피부르산염을 함유하고 있는 DMEM (DMEM-GGP)을 각각 3:1 (#1), 1:1 (#2) 및 1:3 (#3)의 비율로 혼합한 배양액을 제조하였다. Vero 세포 단층이 형성된 배양용기에 DMEM #1 배양액을 각각 10 mL, 30 mL 및 50 mL 씩 넣어 48시간 배양 후 회수하여 보관하였다가 사용하였으며, 각각의 배양액에 생쥐배아를 배양하여 48시간 및 96시간에 발달을 비교하였다. 또한 20% 난포액을 함유하고 있는 DMEM #2 배양액을 Vero 세포와 공배양한 군을 대조군으로 하여 각각 DMEM #1, #2 및 #3 배양액으로 제조된 3가지 SF-VCM에도 생쥐배아를 배양하여 발달을 서로 비교하였다. Vero 세포와의 공배양군을 제외하고 모든 실험군에는 10% SSS를 첨가하여 사용하였다. 결과에 대한 유의성 검증은 Chi-square test를 이용하였고, P값이 0.05 이하일 때 유의한 차이가 있는 것으로 판정하였다. 결과: DMEM #1 배양액 30 mL를 넣은 군에서 각 단계 발달률 (상실배아≤: 97.2%, 주머니배≤: 97.2%, 탈출 주머니배≤: 82.2%)이 다른 실험군들에 비해 유의하게 높게 나타났다 (P<0.05). Vero 세포와의 공배양과 다양한 SF-VCM에서 생쥐 배아의 체외배양 효과를 비교한 결과에서는 DMEM #1 배양액으로 제조된 SF-VCM #1 실험군 (Group I)에서 각 단계별 발달률 (상실배아≤: 98.1%, 주머니배≤: 97.1%, 탈출 주머니배≤: 81.7%)이 다른 실험군들에 비해 높게 나타났으며, 배양 96시간 후 탈출 주머니배 이상으로의 발달에서는 대조군 (67.6%)보다 유의하게 높은 발달률을 나타내었다 (P<0.05). 결론: Vero 세포 단층이 형성된 배양용기에 DMEM #1 배양액을 사용하여 SF-VCM을 제조하는 경우 250 mL 플라스크에 30 mL의 용량으로 배양하는 것이 가장 효과적이며, 이는 다른 농도의 배양액에 비해 더 높은 체외 발달률을 유도 할 수 있어 사람의 시험관 아기 시술에서 응용해 볼 만한 가치가 있을 것이라 사료된다.

Objective: The purpose of this study was to examine in vitro development of early preimplantation mouse embryos in various kind of serum-free conditioned media (SF-VCM) manufactured from DMEM cultured with Vero Cells. Methods: A total of 846 two-cell mouse embryos were cultured in different kind of SF-VCM. SF-VCMs were divided into SF-VCM-10, -30 and -50 by media volume using DMEM #1 media, and divided into SF-VCM #1, #2 and #3 by controlled concentration of glucose and pyruvate (manufactured by DMEM #1: mixed three volume of DMEM-G (DMEM with glutamine without glucose and pyruvate) and one volume of DMEM-GGP (DMEM with glutamine, glucose, pyruvate), #2: mixed same volume of DMEM-G and DMEM-GGP and #3: mixed one volume of DMEM-G and three volume of DMEM-GGP, respectively). Experimental groups were mainly added 10% SSS, and 20% hFF was added to only Control group co-cultured with Vero cells. Development of embryos was observed every 24 hours. Results between different groups were analyzed using Chi-square test, and considered statistically significant when P-value was less than 0.05. Results: In vitro developmental rate by each cleavage stages of mouse embryos cultured in SF-VCMs with a various volumes were significantly (P<0.05) higher in SF-VCM-30 (morula≤: 97.2%, Blastocyst (BL)≤: 97.2%, Hatching BL≤: 82.2%) than other groups. In the rate of development on in vitro co-culture vs. a various SF-VCMs manufactured by DMEM controlled concentration of glucose and pyruvate, Group I (SF-VCM #1) was higher than other groups in each cleavage stages (morula≤: 98.1%, Blastocyst (BL)≤: 97.1%, hatching BL≤: 81.7%, respectively). Moreover, specially, in the developmental rate into the hatching blastocyst ≤ after 96 hours in vitro culture, Group I (81.7%) was significantly higher than control group (67.6%, P<0.05). Conclusion: SF-VCM #1 manufactured by volume of 30 mL DMEM #1 media cultured in vitro for 48 hours in 250 mL flask was the most effective on in vitro developmental rate of mouse preimplantation embryos. Therefore, it is expected that SF-VCM #1 has application to human IVF-ET.

#무혈청 적응용 배양액 #Vero 세포 #체외 공배양 #체외수정 #DMEM #Serum-free conditioned media #Vero cells #DMEM #In vitro co-culture #In vitro fertilization

참고문헌 (16)

참고문헌 신청

Barmat LI / 1997 / Growth factor expression by human oviduct and buffalo rat liver coculture cells / Frtil Steril 67 : 775 ~ 779

Bongso A / 1989 / Improved quality of human embryos when co-cultured with human ampullary cells / Hum Reprod 4 : 706 ~ 713

Bongso A / 1995 / Coculture techniques for blastocyst transfer and embryonic stem cell production / Assist Reprod Rev 5 : 106 ~ 114

Cole RJ / 1965 / Properties of cultured preimplantation mouse and rabbit and cell strains developed from them. In Preimplantation stages of pregnancy : 82 ~ 155

Fukui Y / 1991 / Factor affecting the in-vitro development to blastocysts of bovineoocytes matured and fertilized in vitro / Reprod Ferti 92 : 125 ~ 131

함께 읽어보면 좋을 논문

논문 유사도에 따라 DBpia 가 추천하는 논문입니다. 함께 보면 좋을 연관 논문을 확인해보세요!

이 논문의 저자 정보

김주환

소속기관 대한산부인과학회

주요연구분야 의약학 > 임상의학 > 산부인과학

논문수 1 이용수 23

서영석

소속기관 대한산부인과학회

주요연구분야 의약학 > 임상의학 > 산부인과학

논문수 1 이용수 23

송해범

소속기관 대한산부인과학회

주요연구분야 의약학 > 임상의학 > 산부인과학

논문수 6 이용수 63

양정보

소속기관 대한산부인과학회

주요연구분야 의약학 > 임상의학 > 산부인과학

논문수 1 이용수 23

이경은

소속기관 대한산부인과학회

주요연구분야 의약학 > 임상의학 > 산부인과학

논문수 9 이용수 103

이기환

소속기관 대한산부인과학회

주요연구분야 의약학 > 임상의학 > 산부인과학

논문수 1 이용수 23

최근 본 자료

전체보기

구분	그룹	데이터 항목
AI 학습용 데이터	원문	원문 PDF 파일
AI 학습용 데이터	원문 + 메타 (기본/상세)	원문 PDF 파일 및 서지정보 CSV
대량 구매용 데이터	B2B 구독 방식	특정 자료 한정으로 원문 접근 권한 부여
대량 구매용 데이터	URL 전달 방식	바로 PDF 뷰어를 열람할 수 있는 URL 제공

구분	그룹	데이터 항목
AI 학습용 데이터	기본 메타	발행기관명, 간행물명, 권호명, 권(vol), 호(issue), 통권, 발행연도, 발행월, 논문명, 저자명, 시작페이지, 종료페이지, 전체페이지, 상세페이지URL
상세 메타 데이터	발행기관 메타	발행기관 이명, 영문명, 창립연도, 홈페이지URL, 발행기관 소개
	간행물 메타	부제목, 간행물 유형, ISSN, ISBN, 최초발행연도, 폐간연도, 간행빈도, 발행주기, 등재사항, 이용수, 피인용수, 권호수, 논문수, 표지이미지
	논문 메타	작성 언어, 부제목, 대등제목, 목차, 키워드, 초록, 이미지, 참고문헌, 이용수, 피인용수, 논문활용도, DBpia통합주제분류, KDC분류, DDC분류, 한국연구재단분류, UCI, DOI
	저자 메타	소속기관, 소속부서, 직급, 연구분야, 연구키워드, 이용수, 피인용수, 저자 논문활용도

구분	그룹	데이터 항목
※ 결합형/맞춤형 메타 데이터는 신청 내용에 따라 다양하게 제공 가능
이용순위 정보	주제분야별 많이 이용된 논문	“인문학”에서 많이 이용된 논문 TOP100
	이용기관별 많이 이용된 논문	“중고등학교”에서 많이 이용된 논문 TOP100
	세부기관별 많이 이용된 논문	“서울대학교”에서 많이 이용된 논문 TOP100
	키워드별 많이 이용된 논문	“Chat GPT”에서 많이 이용된 논문 TOP100
키워드 정보	많이 이용된 키워드	특정기간/분야/저널 내 많이 이용된 키워드
	많이 발행된 키워드	특정기간/분야/저널 내 많이 발행된 키워드
	많이 검색된 키워드	특정기간/분야/저널 내 많이 검색된 키워드
	연구 트렌드 키워드	특정 키워드 연관 연구동향 분석 데이터 키워드

논문 기본 정보

초록· 키워드

AI 요약

연구주제

연구배경

연구방법

연구결과

주요내용

목차

참고문헌 (16)

함께 읽어보면 좋을 논문

이 논문의 저자 정보

최근 본 자료

댓글(0)