농양 진단을 위한 $^{99m}Tc-HYNIC-PEG-liposomes$의 제조

홍준표; 오옥두; 김현석; 이은숙; 이태섭; 최태현; 최창운; 임상무

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저자정보: 홍준표 (연세대학교 보건과학대학 임상병리학과) 오옥두 (연세대학교 보건과학대학 임상병리학과) 김현석 (연세대학교 보건과학대학 임상병리학과) 이은숙 (연세대학교 보건과학대학 임상병리학과) 이태섭 (연세대학교 보건과학대학 임상병리학과) 최태현 (연세대학교 보건과학대학 임상병리학과) 최창운 (연세대학교 핵의학과) 임상무 (연세대학교 핵의학과)

저널정보: 대한핵의학회 대한핵의학회지 대한핵의학회지 제36권 제6호

발행연도: 2002.1

수록면: 333 - 343 (11page)

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이 논문의 연구 히스토리 (2)

2002

농양 진단을 위한 $^{99m}Tc-HYNIC-PEG-liposomes$의 제조

홍준표 , 오옥두 , 김현석 외 5명 대한핵의학회지 2002.01 학술저널

2001

농양 진단을 위한 $^{99m}Tc$-HYNIC-liposome의 제조

홍준표 , 김현석 , 이은숙 외 5명 대한핵의학회 학술대회 2001.01 학술대회자료

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목적: BFCA 중 하나인 HYNIC을 제조하고, 염증부위에 선택적으로 국소화 되어 진단할 수 있는 PEG-liposome과 결합시켜 HYNIC-PEG-liposome을 제조하며, 제조된 HYNIC-PEG-liposome에 방사성 동위원소인 $^{99m}Tc$의 표지 방법을 확립하고자 하였다. 대상 및 방법: 6-Chloronicotinic acid를 출발물질로 하여 succinimidyl 6-BOC-hydrazinopyridine-3-carboxylic acid를 순차적으로 합성하였다. Triethylamine을 이용해 합성된 succinimidyl 6-BOC-hydrazinopyridine-3-carboxylic acid와 DSPE를 접합하였다. HYNIC-DSPE를 제조한 후에 EPC:PEG-DSPE: HYNIC-DSPE:cholesterol을 1.85:0.15 :0.07:1의 몰 비로 혼합하여 HYNIC-PEG-liposome을 제조하였다. 제조된 HYNIC-PEG-liposome에 $SnCl_2{\cdot}2H_2O$와 tricine을 이용하여 $^{99m}Tc$를 표지하였다. $^{99m}Tc$-HYNIC-PEG-liposome과 혈청을 섞어서 실온과 $37^{\circ}C$에서 24시간까지 안정성을 확인하였다. $^{99m}Tc$-HYNIC-PEG-liposome에 DTPA, cysteine, glutathione을 각각 과량의 몰 비로 섞고 $37^{\circ}C$에서 1시간 반응 후에 trans- chelation을 통해 안정성을 확인하였다. 결과: 6-Chloronicotinic acid를 출발물질로 하여 6-hydrazinopyridine-3-carboxylic acid, 6-BOC-hydrazinopyridine -3-carb-oxylic acid, succinimidyl-6-BOC-hydra-zino-pyri- dine-3-carboxylic acid를 합성하였으며 각각의 합성수율은 88.5%, 93.7%, 93.2%였고 최종수율은 77.3%였다. 제조된 HYNIC-PEG-liposome의 직경은 106 nm였고, PEG-liposome에 접합된 HYNIC의 농도는 1.08 nM이었다. HYNIC-PEG- liposome의 개수는 1 ml에 $5.2{\times}10^{14}$개가 존재하였고, PEG- liposome 한 개당 HYNIC은 약 1250개가 접합되었다. 제조된 HYNIC-PEG-liposome에 $SnCl_2{\cdot}2H_2O$와 tricine을 이용하여 $^{99m}Tc$를 표지하였으며 그 표지수율은 99%이상이었다. 혈청 내에서 24시간까지 93.5% 이상의 안정성을 나타내었다. DTPA, cysteine, glutathione을 각각 1000배의 몰 비를 첨가한 경우 $^{99m}Tc$-HYNIC- PEG-liposome의 방사화학적순도가 각각 98%, 96%, 99%으로서 안정하였다. 결론: BFCA중 하나인 HYNIC을 이용한 $^{99m}Tc$-HYNIC-PEG-liposome의 제조는 손쉬운 표지방법과 높은 표지수율 그리고 안정성을 나타낼 수 있는 방법으로서, 이를 염증부위에 선택적으로 국소화되어 염증의 진단에 유용하게 사용될 수 있을것으로 기대된다.

Purpose: A new linker, hydrazino nicotinamide (HYNIC), was recently introduced for labelling of liposome with $^{99m}Tc$. In this study we synthesized HYNIC derivatized PEG (polyethylene glycol)-liposomes radiolabeled with $^{99m}Tc$. Materials and Methods: In order to synthesize HYNIC-DSPE (distearoyl phosphatidyl ethanolamine) which is a crucial component for $^{99m}Tc$ chelation, first of all succinimidyl 6-BOC-hydrazinopyridine-3-carboxylic acid was synthesized from 6-chloronicotinic acid by three sequential reactions. A DSPE derivative of succinimidyl 6-BOC-hydrazinopyridine-3-carboxylic acid was transformed into HYNIC-DSPE by HCI/dioxane. HYNIC-PEG-liposomes were prepared by hydration of the dried lipid mixture of EPC (egg phosphatidyl choline): PEG-DSPE : HYNIC-DSPE:cholesterol (1.85:0.15:0.07:1, molar ratio). The HYNIC-PEG-liposomes were labeled with $^{99m}Tc$ in the presence of $SnCl_2{\cdot}2H_2O$ (a reducing agent) and tricine (a coligand). To investigate the level of in vivo transchelation of $^{99m}Tc$ in the liposomes, the $^{99m}Tc$-HYNiC-PES-liposomes were incubated with a molar excess of DTPA, cysteine or glutathione solutions at $37^{\circ}C$ for 1 hour. The radiolabeled liposomes were also incubated in the presence of human serum at $37^{\circ}C$ for 24 hours. Results: 6-BOC-hydrazinopyridine-3-carboxylic acid was synthesized with 77.3% overall yield. The HYNIC concentration in the PEG-coated liposome dispersion was 1.08 mM. In condition of considering the measured liposomal size of 106 nm, the phospholipid concentration of $77.5\;{\mu}mol/m{\ell}$ and the liposomal particle number of $5.2{\times}10^{14}$ liposomes/ml, it is corresponded to approximate 1,250 nicotinyl hydrazine group per liposome in HYNIC-PEG-liposome. The removal of free $^{99m}Tc$ was not necessary because the labeling efficiency were above 99%. The radiolabeled liposomes maintained 98%, 96% and 99%, respectively, of radioactivity after incubation with transchelators. The radiolabeled liposomes possessed above 90% of the radioactivity in serum. Conclusion: These results suggest that the HYNIC can be synthesized easily and applied in labelling of PEG-liposomes with $^{99m}Tc$.

#$^{99m}Tc$ #HYNIC #Liposomes #Abscess imaging

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