수핵 난자의 활성화 방법과 공핵 수정란의 배양체계 및 할구의 크기가 소 핵이식 수정란의 발달에 미치는 영향

심보웅; 조성근; 이효종; 박충생; 최상용

추천

검색

자료유형: 학술저널

저자정보: 심보웅 (경상대학교 농과대학 축산학과) 조성근 (경상대학교 농과대학 축산학과) 이효종 (경상대학교 수의학과) 박충생 (경상대학교 농과대학 축산학과) 최상용 (경상대학교 수의학과)

저널정보: 한국동물번식학회 한국동물번식학회지 한국동물번식학회지 제22권 제4호

발행연도: 1998.1

수록면: 425 - 435 (11page)

이용수

📌

연구주제

📖

연구배경

🔬

연구방법

🏆

연구결과

초록· 키워드

오류제보하기

본 연구는 핵이식 효율을 증진시키기 위하여 소의 핵이식에 있어서 MII 의 탈핵난자의 활성화 방법과 공핵란으로써 개별배양과 그룹배양된 수정란을 사용하여 할구분리시 발견할수 있는 할구의 크기별로 대ㆍ소로 구분하여 핵이식에 미치는 영향을 비교하여 다음과 같은 결론을 얻었다. 1. 핵이식에 있어 MII의 탈핵난자에 5$\mu$M ionomycin 에서 5분 처리후 2.0 mM DMAP 을 4시간동안 처리구, 탈핵 후 체외성축으로부터 39~43시간에 2.0 mM DMAP 올 4시간동안 처리구와 탈핵후 체외성숙으로부터 39~42시간에 실온에 3시간 두어 활성을 유도한 처리구에서 융합율은 각각 68, 74.7와 72.8%를 보여 유의적인 차이를 나타내지 않았으며, 배반포기배로의 발달율에 있어서도 10.0, 14.3와 9.0%로써 처리구간의 유의적인 차이는 보이지 않았다. 하지만 핵이식 후 7일째 배반포기 배로 발달한 수정란의 할구수에서는 각 처리구 별로 79.2개, 73.4개 그리고 53.2개로 체외성숙으로부터 39~42시간에 실용에 3시간 두어 활성화를 유도한 처리구가 다른 처리구에 비하여 유의적으로 낮게 나타났다 (P＜0.05). 2. 수정후 90시간 개별 배양 또는 그룹배양된 수정란의 평균할구수는 11.1 개로 같게 나타났으며 할구분리시 할구의 크기는 평균 46.8, 46.6$\mu\textrm{m}$로 나타났으며, 두 그룹 모두 46$\mu\textrm{m}$를 기준으로 large 와 small 로 나누었을 때 개별배양에서는 할구의 크기가 42.0, 50.9$\mu\textrm{m}$로 측정되었으며, 그룹배양에서는 41.6, 50.6$\mu\textrm{m}$로 측정되었다. 수정후 114시간 개별 및 그룹배양된 수정란의 평균할구수는 16.8개와 17.6개로 나타났으며, 할구분리시 할구의 크기는 평균 39.3, 38.7$\mu\textrm{m}$로 나타났다. 두 그룹 모두 38$\mu\textrm{m}$ 를 기준으로 Large 와 small로 나누었을 때 개별배양에서는 할구의 크기가 42.5, 35.2$\mu\textrm{m}$로 측정되었으며, 그룹배양에서는 42.1, 34.8$\mu\textrm{m}$ 로 측정되었다. 3. 핵이식 수정란의 세포융합율에 있어서 수정 후 90시간 개별배양된 수정란의 small 과 large 의 할구를 공핵체로 사용한 처리구에서 69.2 와 72.3%, 그룹배양된 수정란의 small 과 large의 할구를 공핵체로 사용한 처리구에서는 71.6와 76.3%의 융합율을 보여 유의적으로 차이를 나타내지 않았으며, 핵이식 수정란의 배반포기배로의 발달율에 있어서도 각 각 11.1, 10.2, 12.2 그리고 13.0%의 발달율을 보여 유의적인 차이를 보이지 않았다. 4. 수정 후 114 시간 개별배양된 수정란으로부터 분리된 small과 large의 할구를 공핵체로 사용한 처리구에서 핵이식 수정란의 세포융합율에 있어서 각각 71.0, 71.4, 69.9 및 77.1% 의 융합율올 보여 유의적인 차이를 나타내지 않았으며, 핵이식 수정란의 배반포기배로의 발달율에 있어서도 각각 11.4%, 8.0%, 17.2% 그리고 12.9% 의 발달율을 보여 유의적인 차이를 보이지 않았다. 이상의 결과로 보아 핵이식 수정란을 효율적으로 생산하기 위하여 수핵난자의 세포질에 ionomycin 과 DMAP 의 혼합처리로 탈핵난자의 활성화를 유도하는 것이 효율을 증진시킬 수 있었다고 본다. 또한 공핵수정란을 수정 후 90시간과 114시간 개별 배양하여 할구를 공핵체로 핵이식에 이용하였을 때도 그룹배양에 비하여 효율이 떨어지지 않음을 알 수 있었으며, 수정란의 할구 크기의 차이가 핵이식 수정란의 생산효율에 영향을 미치지 않음을 알 수 있었다.

To improve the efficiency of nuclear transplantation in bovine, in this study the development in vitro of nuclear transferred (NT) embryos was compared by different activation regimens of the enucleated oocytes. The effect of developmental stage and culture system of donor nuclei on fusion and development in vitro of NT embryos were also evaluated. Oocytes were collected from Hanwoo ovaries obtained from slaughterhouse and matured in Ham's F-10 supplemented with hormones. After 20~22 h maturation, the oocytes were vortexed to be free from cumulus cells and subsequently their nucleus and the first polar body were removed. Enucleated oocytes were divided into 3 groups for activation; the oocytes of group I were activated with ionomycin for 5 min and subsequently incubated in 6-dimetylarninopurine (DMAP) for 4 h, Those of group II were treated with DMAP for 4 h at 39 h after onset of in vitro maturation (IVM) and those of group III were kept in room temperature ($25^{\circ}C$) for 3 h at 39 h after onset of IVM. After in vitro fertilization (IVF) the embryos for muclear donor were cultured either by group culture (20 embryos /50 ${mu}ell$ drop) or individually (1 embryo /50 ${mu}ell$ drop) for 4 day and 5 day. At day 4 and 5 after IVF, blastomeres were separated in calcium-magnesium free medium, and then classified into small (day 5: $\leq$ 38 ${\mu}{\textrm}{m}$, day 4: $\leq$ 46 ${\mu}{\textrm}{m}$) and large (day 5 : $\geq$ 38 ${\mu}{\textrm}{m}$, day 4 ; $\geq$ 46 ${\mu}{\textrm}{m}$). The separated blastomeres were replaced into enucleated and activated recipient cytoplasm. The blastomere-oocyte complexes were fused by electrically. The NT embryos were cultured in TCM-199 containing 10% FCS in 39$^{\circ}C$, 5% $CO_2$ incubator for 7 day. The results obtained were summarized as follows; There were no differences in fusion and development to blastocyst between groups as group I (68%, 10%), group II (75%, 14%) and group III (73%, 9%), respectively. However, the cell number in blastocyst of NT embryos in group III were significantly fewer than in the other groups (P＜0.05). No differences in fusion and development to blastocyst were found between individual or group cultured and between small or large blastomeres of day 4 and day 5 donor embryos. From these results, it was concluded that the combination of ionomycin and DMAP, or treatment of DMAP at 39 h after onset of IVM were useful for the efficient of production of NT bovine embryos, and the individual cultured embryos could be simply used as donor nuclei for NT bovine embryo.

#Ionomycin #DMAP #Activation #Nuclear transplantation #Bovine

참고문헌 (0)

참고문헌 신청

참고문헌이 DBpia에서 서비스 중이라면, [참고문헌 신청]을 통해 등록해보세요

함께 읽어보면 좋을 논문

논문 유사도에 따라 DBpia 가 추천하는 논문입니다. 함께 보면 좋을 연관 논문을 확인해보세요!

이 논문의 저자 정보

심보웅

소속기관 [주]마크로젠

주요연구분야 농수해양학 > 축산학

논문수 8 이용수 9

조성근

소속기관 경상대학교

주요연구분야 농수해양학 > 축산학

논문수 27 이용수 20

Hyo-Jong Lee

소속기관 경상대학교 수의학과

주요연구분야 의약학 > 수의학 농수해양학 > 축산학

논문수 53 이용수 75

박충생

소속기관 경상대학교

주요연구분야 농수해양학 > 축산학

논문수 82 이용수 140

최상용

소속기관 경상대학교

주요연구분야 농수해양학 > 축산학

논문수 67 이용수 74

최근 본 자료

전체보기

구분	그룹	데이터 항목
AI 학습용 데이터	원문	원문 PDF 파일
AI 학습용 데이터	원문 + 메타 (기본/상세)	원문 PDF 파일 및 서지정보 CSV
대량 구매용 데이터	B2B 구독 방식	특정 자료 한정으로 원문 접근 권한 부여
대량 구매용 데이터	URL 전달 방식	바로 PDF 뷰어를 열람할 수 있는 URL 제공

구분	그룹	데이터 항목
AI 학습용 데이터	기본 메타	발행기관명, 간행물명, 권호명, 권(vol), 호(issue), 통권, 발행연도, 발행월, 논문명, 저자명, 시작페이지, 종료페이지, 전체페이지, 상세페이지URL
상세 메타 데이터	발행기관 메타	발행기관 이명, 영문명, 창립연도, 홈페이지URL, 발행기관 소개
	간행물 메타	부제목, 간행물 유형, ISSN, ISBN, 최초발행연도, 폐간연도, 간행빈도, 발행주기, 등재사항, 이용수, 피인용수, 권호수, 논문수, 표지이미지
	논문 메타	작성 언어, 부제목, 대등제목, 목차, 키워드, 초록, 이미지, 참고문헌, 이용수, 피인용수, 논문활용도, DBpia통합주제분류, KDC분류, DDC분류, 한국연구재단분류, UCI, DOI
	저자 메타	소속기관, 소속부서, 직급, 연구분야, 연구키워드, 이용수, 피인용수, 저자 논문활용도

구분	그룹	데이터 항목
※ 결합형/맞춤형 메타 데이터는 신청 내용에 따라 다양하게 제공 가능
이용순위 정보	주제분야별 많이 이용된 논문	“인문학”에서 많이 이용된 논문 TOP100
	이용기관별 많이 이용된 논문	“중고등학교”에서 많이 이용된 논문 TOP100
	세부기관별 많이 이용된 논문	“서울대학교”에서 많이 이용된 논문 TOP100
	키워드별 많이 이용된 논문	“Chat GPT”에서 많이 이용된 논문 TOP100
키워드 정보	많이 이용된 키워드	특정기간/분야/저널 내 많이 이용된 키워드
	많이 발행된 키워드	특정기간/분야/저널 내 많이 발행된 키워드
	많이 검색된 키워드	특정기간/분야/저널 내 많이 검색된 키워드
	연구 트렌드 키워드	특정 키워드 연관 연구동향 분석 데이터 키워드

논문 기본 정보

초록· 키워드

AI 요약

연구주제

연구배경

연구방법

연구결과

주요내용

목차

참고문헌 (0)

함께 읽어보면 좋을 논문

이 논문의 저자 정보

최근 본 자료

댓글(0)