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자료유형
학술저널
저자정보
Shah, Sajita (College of Pharmacy, Duksung Innovative Drug Center, Duksung Women's University) Kang, Kyu-Tae (College of Pharmacy, Duksung Innovative Drug Center, Duksung Women's University)
저널정보
한국응용약물학회 Biomolecules & Therapeutics(구 응용약물학회지) Biomolecules & therapeutics 제26권 제5호
발행연도
2018.1
수록면
474 - 480 (7page)

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Most angiogenesis assays are performed using endothelial cells. However, blood vessels are composed of two cell types: endothelial cells and pericytes. Thus, co-culture of two vascular cells should be employed to evaluate angiogenic properties. Here, we developed an in vitro 3-dimensional angiogenesis assay system using spheroids formed by two human vascular precursors: endothelial colony forming cells (ECFCs) and mesenchymal stem cells (MSCs). ECFCs, MSCs, or ECFCs+MSCs were cultured to form spheroids. Sprout formation from each spheroid was observed for 24 h by real-time cell recorder. Sprout number and length were higher in ECFC+MSC spheroids than ECFC-only spheroids. No sprouts were observed in MSC-only spheroids. Sprout formation by ECFC spheroids was increased by treatment with vascular endothelial growth factor (VEGF) or combination of VEGF and fibroblast growth factor-2 (FGF-2). Interestingly, there was no further increase in sprout formation by ECFC+MSC spheroids in response to VEGF or VEGF+FGF-2, suggesting that MSCs stimulate sprout formation by ECFCs. Immuno-fluorescent labeling technique revealed that MSCs surrounded ECFC-mediated sprout structures. We tested vatalanib, VEGF inhibitor, using ECFC and ECFC+MSC spheroids. Vatalanib significantly inhibited sprout formation in both spheroids. Of note, the $IC_{50}$ of vatalanib in ECFC+MSC spheroids at 24 h was $4.0{\pm}0.40{\mu}M$, which are more correlated with the data of previous animal studies when compared with ECFC spheroids ($0.2{\pm}0.03{\mu}M$). These results suggest that ECFC+MSC spheroids generate physiologically relevant sprout structures composed of two types of vascular cells, and will be an effective pre-clinical in vitro assay model to evaluate pro- or anti-angiogenic property.
#Angiogenesis #Endothelial colony forming cells #Mesenchymal stem cells #Two-cell spheroid

목차

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참고문헌 (40)

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Arnaoutova, I. / 2010 / In vitro angiogenesis: endothelial cell tube formation on gelled basement membrane extract. Nat / Nat. Protoc. 5:628~635 Crossref Asahara, T. / 1997 / Isolation of putative progenitor endothelial cells for angiogenesis / Science 275:964~967 Crossref Ayala-Cuellar, A. P / 2018 / Roles of mesenchymal stem cells in tissue regeneration and immunomodulation / Biomol. Ther google schola Banerjee, S. / 2009 / The vascular endothelial growth factor receptor inhibitor PTK787/ZK222584 inhibits aromatase / Cancer Res. 69:4716~4723 Crossref Carmeliet, P. / 2000 / Mechanisms of angiogenesis and arteriogenesis / Nat. Med. 6:389~395 Crossref

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