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Kim Sewon (국립농업과학원) 심재령 (국립농업과학원) 이수빈 (국립농업과학원) 김범기 (국립농업과학원) 구태원 (동국대학교) 임선형 (한경대학교) 이종렬 (국립농업과학원)
저널정보
한국식물생명공학회 Plant Biotechnology Reports Plant Biotechnology Reports 제15권 제2호
발행연도
2021.1
수록면
151 - 161 (11page)

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Wheat (Triticum aestivum L.) is a major food crop worldwide whose complex and very large genome hinders stable genetic transformation. An optimized method for transformation by particle bombardment is therefore greatly needed, both in general and for Korean commercial wheat varieties, which have not yet been successfully transformed. In this study, we describe the stable transformation of the Korean commercial wheat variety Keumkang and the DH20, which lacks the Glu-B3 and Gli?B1 loci (both related to gluten production), via particle bombardment of a vector harboring the enhanced green fuorescent protein (eGFP) gene. We confrmed the insertion of the eGFP transgene into the genome of primary (T0) transformants by genomic PCR, RT-qPCR, and fuorescence imaging. Our estimated average transformation efciencies were 4.4% for Keumkang and 3.5% for DH20 in the T0 generation. We also validated the stable expression of the transgene in the T1 gen?eration. We hypothesize that donor plant health, centrifugation, and high-sucrose pre-treatment increased the transformation efciency reported here. Taken together, these results describe a useful method for transforming Korean commercial wheat varieties, including Keumkang and DH20, that will allow the manipulation of gene expression via such techniques as RNA interference, overexpression, and genome editing.

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